婴幼儿大手术后血清一氧化氮水平变化的观察

一、婴幼儿大手术后血清一氧化氮水平变化的观察（论文文献综述）

汪健,陈易人,朱锦祥^[1]（2002）在《婴幼儿大手术后血清一氧化氮水平变化的观察》文中研究说明 许多研究显示,外科创伤和细胞因子有密切关系。我们以前的研究也发现,婴幼儿手术创伤后的急性期反应与早期选择性细胞因子IL-6的升高有关,IL-6升高与手术应激程度有关。最近报道显示,一氧化氮（nitric oxide,NO）的产生和感染、应激以及免疫系统的活性密切有关。本文旨在观察婴幼儿大手术后NO的变化,并探讨其临床意义。

汪健^[2]（2001）在《手术创伤后炎性细胞因子和细胞反应的临床和基础研究》文中进行了进一步梳理第一部分 婴幼儿腹部大手术后细胞因子的变化 目的：细胞因子是机体应激和感染反应中的重要介质，婴幼儿经历大手术后易导致感染等并发症。方法：对22例婴幼儿进行围手术期细胞因子的研究，分别于手术前30分钟，手术结束时，手术后6小时，12小时，24小时和48小时采血，ELISA法测定IL-6，IL-8和TNF-α，放射免疫分析法测定血清皮质醇，并观察IL-6水平与手术应激程度的关系。结果：围手术期TNF-α的水平无变化，IL-6水平手术结束时即明显增高，术后6小时为最高（P＜0.05），而IL-8水平手术后12小时为最高，血清皮质醇水平在手术结束时明显升高，持续至术后12小时（P＜0.005）。IL-6水平与手术应激程度间有明显的相关关系（r=0.80，P=0.007）。结论：婴幼儿手术创伤后的急性期反应与早期选择性的细胞因子IL-6的升高有关，IL-6的升高与手术应激程度有关，IL-6和IL-8可以作为预测预后的指标。 第二部分 大手术引起血清—氧化氮水平下降 目的：一氧化氮（NO）影响机体的循环、神经、免疫和代谢功能，但婴幼儿大手术后NO的变化尚未报道。方法：10例行大手术的儿童分别于手术前30分钟、手术结束、术后1天和术后3天采血，测定NO、IL-6和CRP水平。结果：手术结束时、术后1天和3天血清亚硝酸盐历肖酸盐浓度下降，血清亚硝酸盐／硝酸盐浓度与IL-6和CRP无相关关系。结论：术中及术后血清亚硝酸盐／硝酸盐浓度的下降可能与组织低灌注有关。

中华医学会呼吸病学分会哮喘学组^[3]（2022）在《咳嗽的诊断与治疗指南（2021）》文中认为近年来, 咳嗽的诊断、治疗与发病机制研究取得了许多新的进展。为及时反映国内外相关研究结果, 中华医学会呼吸病学分会哮喘学组组织了呼吸内科、消化内科、反流外科、耳鼻咽喉科、儿科、中医科等多个学科的专家, 对中国《咳嗽的诊断与治疗指南（2015）》重新进行了修订。对原有的证据等级、推荐强度进行了审核与更新, 新增、删除了部分推荐意见。指南的基本结构保持不变, 主要内容包括咳嗽的定义、流行病学与发病机制, 咳嗽的诊断、评估与检查, 急性、亚急性、慢性咳嗽的诊断与治疗, 咳嗽的经验性治疗与对症治疗等。

李梦杰,李翠萍,李丽,付月强,刘鹏,王彪,周杰^[4]（2021）在《肺隐球菌病并机化性肺炎1例》文中提出隐球菌病是由隐球菌引起的深部真菌感染,主要侵犯中枢神经系统及肺,常发生于免疫功能低下的患者,免疫功能正常的人群也有发生,肺部隐球菌感染临床与影像表现多样,缺乏特异性,容易误诊。肺隐球菌病并机化性肺炎仅见个案报道[1-2],我们遇到1肺隐球菌病并机化性肺炎患者, 现报道如下。病例介绍患者女性,58岁,农民。主因头晕18天于2021-01-05,08:28入院。患者既往有"高血压病"病史3年,血压最高达150/95 mmHg,

邵徽英,张马忠,郑吉建^[5]（2021）在《先天性心脏病患儿纠治术后急性肾损伤的研究进展》文中研究表明急性肾损伤（acute kidney injury, AKI）是心脏手术后最常见的主要并发症之一。心脏手术后患儿的AKI发生率高达42%,而且AKI的发生与围手术期病死率相关。文章就先天性心脏病（先心病）患儿术后AKI的发生情况、发病机制、风险因素、预测及防治策略进行概述,并总结先心病患儿术后发生AKI的相关高风险因素及预防性策略应用的最新进展,以期指导临床合理地规避风险,谨慎选择干预策略。

常宇飞^[6]（2021）在《高压氧预处理和后处理对低压低氧环境造成的大鼠认知功能障碍的保护作用研究》文中研究表明目的:本实验拟探究高压氧预处理与后处理能否有效保护因低压低氧环境所致大鼠认知功能障碍,并探讨Nrf2,HO-1蛋白在其产生保护作用过程中的部分可能机制。方法:预处理组:采用雄性SD大鼠40只（体重180-220g）,随机分为4组:空白对照组（D组）10只（不接受高压氧或低压氧处理）;高压氧对照组（HBO组）10只（只接受每天一次连续五天的高压氧预处理,不接受低压氧处理）;低压低氧组（S组）10只（接受连续2天的低压低氧处理）;高压氧预处理+低压低氧组（Pre HBO组）10只（接受每天一次连续五天的高压氧预处理,处理结束后第二天开始接受连续两天的低压低氧处理）。后处理组:采用雄性SD大鼠40只（体重180-220g）,随机分为4组:空白对照组（D组）10只（不接受高压氧或低压氧处理）;高压氧对照组（HBO组）10只（只接受每天一次连续五天的高压氧预处理,不接受低压氧处理）;低压低氧组（S组）10只（接受连续2天的低压低氧处理）;高压氧后处理+低压低氧组（Post HBO组）10只（先接受连续两天的低压低氧处理,处理结束后接受每天一次连续五天的高压氧后处理）。预处理组与后处理组的高压氧条件为2.5ATA,氧浓度要超过80%,CO2浓度<0.05%;预处理组与后处理组的低压氧条件为350 mm Hg,6%-7%O2。低压低氧处理后第八天开始利用Morris水迷宫及Y迷宫评价大鼠认知功能。低压低氧处理后不同时间点采用ELISA法分别测定各组大鼠血清促炎因子IL-6、IL-1β、TNF-α含量,各组大鼠海马组织Nrf2,HO-1蛋白表达情况。结果:1、低压低氧处理组大鼠处理后Y迷宫实验交替得分率相比对照组明显降低,高压氧预处理+低压低氧处理组大鼠和高压氧后处理+低压低氧处理组大鼠在Y迷宫实验中交替得分率均比低压低氧处理组大鼠明显升高。2、ELISA结果:实验动物经低压低氧处理后定时检测血清促炎因子,在不同时间点完成,明确IL-6、IL-1β、TNF-α含量,结果显示单纯低压低氧处理组高于高压氧预处理和后处理组。3、高压氧预处理和后处理组大鼠海马组织Nrf2,HO-1蛋白表达明显高于单纯低压低氧处理组。4、单独高压氧处理组与空白对照组相比,大鼠认知功能无显着差异。结论:急性低压低氧环境对大鼠可能存在一定伤害性,使得其早期认知功能下降,而进行高压氧预处理和后处理,可以缓解其认知功能下降的程度。对其机制进行探讨,考虑经高压氧处理后促炎因子释放减少,引起适度氧化应激,提高海马组织内Nrf2蛋白的表达,从而产生神经保护作用。

冯俊祥^[7]（2021）在《阿托伐他汀对氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型中炎性因子及癫痫发作的影响》文中指出背景癫痫是一种多病因导致的神经系统电-临床综合征,发病机制尚未完全清楚。白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素–6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎性因子在机体诸多生理活动乃至病理活动中都发挥着生物学作用。他汀类药物除了调脂外,还有抗氧化应激、抗炎等神经保护作用。本课题组前期研究发现他汀类药物还具有抗癫痫作用,然而他汀类药物治疗与IL-1β、IL-6和TNF-α水平的相关性及对大鼠癫痫模型各时期的影响均尚不清楚,为此,本研究使用氯化锂-匹罗卡品诱导的癫痫动物模型,探讨阿托伐他汀对癫痫发作的影响并分析其相关可能机制。目的研究阿托伐他汀（Atorvastatin,ATV）对SD大鼠氯化锂-匹罗卡品（LI-PILO）癫痫模型的行为学影响,以及与炎性因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）水平的相关性,探讨ATV对LI-PILO诱导的癫痫模型是否具有神经保护作用并分析其相关可能机制。方法1.通过腹腔注射LI-PILO诱导癫痫模型,使用24小时视频监控系统观察记录实验组（10mg/kg ATV组和50mg/kg ATV组）和对照组（生理盐水对照）SD大鼠在急性期不同时间点（10min、20min、30min、40min、50min）癫痫发作程度评分,潜伏时间和潜伏期,以及自发性癫痫发作的次数等行为学变化。2.通过腹腔注射LI-PILO诱导癫痫模型,应用ELISA方法检测ATV组及对照组SD大鼠在慢性期血清IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子水平。3.通过腹腔注射LI-PILO诱导癫痫模型,使用尼氏染色方法检测ATV组及对照组SD大鼠在慢性期神经元损伤情况。4.运用SPSS 23.0统计学软件来统计分析数据,t检验评估两组间的显着性;单因素方差分析（One-way ANOVA）及Bonferroni后检验来比较各组之间的差异。结果1.在LI-PILO诱导癫痫模型的急性期,相比对照组,10mg/kg和50mg/kg ATV组在不同时间点（20min、30min、40min）,癫痫发作级别明显下降,差异有统计学意义（P<0.001和P<0.001）。在急性期,相比对照组,10mg/kg和50mg/kg ATV组均能明显延长癫痫发作的潜伏时间,差异有统计学意义（P<0.05和P<0.01）。在潜伏期,相比对照组,10mg/kg和50mg/kg ATV组均能延长癫痫发作潜伏期,差异有统计学意义（P<0.05和P<0.05）。在慢性期,相比对照组,10mg/kg和50mg/kg ATV组均能减少自发性癫痫的发作,差异有统计学意义（P<0.05和P<0.001）。2.在LI-PILO诱导癫痫模型的慢性期,相比对照组,应用10mg/kg ATV组和50mg/kg ATV实验组IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子较对照组均明显下降,差异有统计学意义（P<0.01和P<0.001）。3.在LI-PILO诱导癫痫模型的慢性期,相比对照组,10mg/kg和50mg/kg ATV实验组有更多神经元存活,差异有统计学意义（P<0.01和P<0.001）。结论阿托伐他汀可能通过抑制炎性因子表达来发挥神经元保护作用减轻LI-PILO诱导癫痫模型中癫痫发作。

王冰^[8]（2021）在《替沃扎尼对脉冲染料激光诱导的血管再生的作用及机制初探》文中研究说明鲜红斑痣（port wine stains,PWS）是一种毛细血管畸形,好发于头面部,严重影响患者的心理健康及精神情感。PWS既可作为单一疾病发病,也可以作为多种综合征的临床表现,本文报告1例具有大面积PWS皮损的色素血管性斑痣性错构瘤病（phakomatosis pigmentovascularis,PPV）Ⅱb型合并克利佩尔-特农那综合症（Klippel-Trenauney syndrome,KTS）及巩膜黑变病的罕见病例,并以此为线索对PWS相关综合征进行综述,PWS皮损在其相关综合征中面积较大且呈进行性发展,使治疗较为困难。脉冲染料激光（pulsed dye laser,PDL）是PWS最主要的治疗方法,但研究显示有相当一部分患者的皮损清除率较低,对治疗具有抵抗,疗效不佳的原因与PDL诱导的血管再生有关。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在PDL诱导的血管再生中发挥重要作用,可以激活血管内皮生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR）的酪氨酸激酶活性,在内皮细胞中引发全方位的反应,进而参与调控血管生成过程。研究表明,替沃扎尼是VEGFR酪氨酸激酶活性抑制剂,能阻断VEGF的促血管生成作用并降低血管通透性,临床上被批准用于晚期及转移性肾细胞癌的治疗,目前对替沃扎尼的研究主要集中在肿瘤方面,本文旨在探索替沃扎尼对PDL诱导的血管再生的作用及机制,为临床治疗PWS提供新的可行方案。本研究中,使用不同能量密度的PDL照射大鼠腹部皮肤,根据照射区域大体及病理变化,选取皮肤表面结痂较小、对血管作用相对较强的能量密度8J/cm2进行后续试验。将大鼠腹部皮肤分为4个区域,使用能量密度8J/cm2对其中的3个区域进行均匀照射,并于激光照射区域分别涂抹不同浓度的替沃扎尼涂膜剂及其基质成分,分组如下:（1）空白组（不用药、无激光照射）、（2）对照组（药物基质、激光照射）、（3）0.5%替沃扎尼组、（4）1%替沃扎尼组。利用相机及皮肤镜进行大体观察、HE染色、免疫组化染色及血管计数对血管再生情况进行检测。结果显示,第7天、第10天及第14天0.5%替沃扎尼组及1%替沃扎尼组分别与对照组相比血管数量明显减少,1%替沃扎尼组与0.5%替沃扎尼组相比血管数量明显减少,表明替沃扎尼成功抑制了PDL诱导的血管再生,且1%替沃扎尼比0.5%替沃扎尼抑制效果更加显着。为探究替沃扎尼抑制PDL诱导的血管再生的作用机制,选取大体及病理结果出现明显差异的第7天作为时间点,并选取血管抑制作用最强的1%替沃扎尼组与对照组组织样本,进行转录组测序。测序结果显示共有588个显着差异表达基因,其中包括90个上调基因,498个下调基因。GO富集分析显示有1004个GO功能条目被显着富集（q<0.05）,差异表达基因在对外界刺激的反应、免疫系统过程、细胞表面受体信号通路、细胞运动、细胞迁移、细胞趋化等条目显示富集较高。KEGG富集分析显示有20个代谢通路被显着富集（q<0.05）,其中细胞因子与受体相互作用、PI3K-Akt信号通路、局部黏附、趋化因子信号通路、RAS信号通路、RAP1信号通路为血管生成相关最主要的富集通路。最后利用实时定量聚合酶链式反应（Real Time Polymerase Chain Reaction,real-time PCR）验证表达差异倍数较高排名靠前的及与血管生成密切相关的基因,分别为Cxcl1、Cxcl2、Cxcl3、Cxcl6、Ccl3、Csf3、IL1β、i NOS、Mmp9、Mmp13、Plau、Ets1、Spp1、Nr4a1,得到的结果与转录组测序结果趋势一致,证明了本次研究的可靠性。本研究探索了替沃扎尼对PDL诱导的血管再生的抑制作用,为临床PWS的治疗提供了新的思路,转录组测序对替沃扎尼抑制PDL诱导的血管再生作用机制进行了探索,为以后的深入研究提供了可靠线索。

李捷婷^[9]（2021）在《基于NMR代谢组学方法的大鼠前交叉韧带损伤后血清代谢特征和相关机制研究》文中进行了进一步梳理目的:骨关节炎（Osteoarthritis,OA）是世界范围内最常见的退行性关节病变,是导致严重疼痛、肢体残疾和生活质量受损的主要原因。近年来,随着“全民健身”理念的深入人心,体育运动日益普及,运动损伤也快速增加,而运动损伤正是导致OA发生的一个重要危险因素。前交叉韧带（anterior cruciate ligament,ACL）损伤作为一种常见的运动损伤,因其可继发创伤后骨关节炎（Post-traumatic osteoarthritis,PTOA）而受到了广泛的关注。目前尚缺乏逆转其病理变化的有效治疗方案,对其代谢特征和发生机制也尚不完全了解。与其他类型OA不同的是,ACL损伤继发的OA存在明确的起始时间,这使得早期预防更具可操作性。我们采用核磁共振（NMR）的代谢组学方法,分析大鼠ACL损伤后血清的代谢特征和相关机制,以期寻找相关的特征性代谢物,阐明涉及的关键代谢通路,为ACL损伤后如何科学有效预防PTOA提供理论依据。方法:本实验采用大鼠前交叉韧带切断（Anterior cruciate ligament transaction,ACLT）法,设置术后4周、8周、12周3个连续的时间点,通过纵向研究来探究膝关节ACL损伤后机体的代谢变化及相关机制。分别以不作任何处理的对照（control）组和假手术（sham）组作为参照进行NMR代谢组学分析。通过多变量统计分析识别代谢模式,并将多变量分析和单变量分析共同筛选出的代谢物定义为特征性代谢物。最后基于KEGG数据库对代谢物进行代谢通路分析。结果:从代谢组学的角度阐明大鼠ACL损伤后血清的代谢紊乱和相关机制,共鉴定出28个代谢物。结果表明,术后4周sham组与ACLT组代谢模式明显分离,提示存在显着差异;术后8周sham组与ACLT组相比,代谢模式仅适度区分,提示存在差异;术后12周sham组与ACLT组代谢模式较难区分,提示存在较少的差异。葡萄糖在代谢组学的分析中被筛选为特征性代谢物,其水平在术后4周sham组vs.ACLT组中升高,并且在术后8周sham组vs.ACLT组中仍呈上升状态,与大鼠血清中显着变化的淀粉与蔗糖代谢通路吻合。除此之外,一些能量相关通路中的关键代谢物如糖酵解和三羧酸循环中的丙酮酸、柠檬酸和琥珀酸水平也出现了不同程度的改变。与术后4周sham组相比,术后4周ACLT组中牛磺酸的水平升高,被认定为特征性代谢物,这也与较为活跃的牛磺酸和次牛磺酸代谢相符。改变的代谢途径主要包括能量代谢（丙酮酸代谢、淀粉与蔗糖代谢）,牛磺酸和次牛磺酸代谢与氨基酸代谢（苯丙氨酸,酪氨酸和色氨酸的生物合成、苯丙氨酸代谢、甘氨酸,丝氨酸和苏氨酸的代谢、组氨酸代谢）。另外,本实验设计了两种不同的对照组,在筛选到的特征性代谢物中,乳酸的水平在两项对比中呈现相反的变化趋势。当以sham组作为对照组时,ACLT组中乳酸水平显着升高;而与control组对比时,ACLT组中乳酸水平则呈现下降趋势。结论:（1）ACL损伤对大鼠机体的生化稳态和代谢造成了重大干扰,但持续时间较短;（2）ACL损伤诱导大鼠血清葡萄糖浓度升高,可能会通过损害软骨细胞的功能促进其变性改变;（3）ACL损伤早期大鼠机体牛磺酸水平的变化可能与关节中软骨骨赘的形成和软骨下骨的硬化有关;（4）ACL损伤后大鼠血清的代谢改变与氨基酸代谢的扰动密切相关,为今后研究PTOA提供了良好的思路。

康丽丽^[10]（2021）在《西地那非通过Notch3/Hes1通路抑制新生大鼠持续性肺动脉高压的机制研究》文中指出研究背景新生儿持续肺动脉高压（Persistent pulmonary hypertension in neonates,PPHN）是指新生儿出生后由于各种原因导致的肺血管阻力持续性增高,肺动脉压超过体循环动脉压,使从胎儿型血液循环过渡到正常（成人）型血液循环发生障碍,导致在心房水平或未闭动脉导管水平发生右向左分流,临床出现不同程度的紫绀和/或难以纠正的低氧血症。PPHN如果治疗不及时或不充分,死亡率和致残率会显着增加。患有PPHN的婴儿可能会发生严重呼吸衰竭,需要重症监护,约10%的病例可能死亡。在存活的患者中,PPHN可能会引起神经损伤、脑瘫、失明等严重的并发症。结构性肺血管重构在PPHN的发病过程中起着重要作用。肺血管重构包括血管内膜、中膜和外膜增厚,导致肺动脉管腔狭窄,肺动脉压力升高。其病理基础主要是肺动脉平滑肌细胞（Pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs）、血管内皮细胞和成纤维细胞发生增殖、迁移和表型转化等改变。Notch3是四种Notch蛋白家族的成员之一,是介导细胞间信号传递的细胞膜受体,在细胞间通信中发挥着重要作用[1]。不同Notch受体可介导不同的细胞效应,Notch3在血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cells,VSMCs）中的表达最多见[2]。Notch3 信号通路异常通常与肺动脉高压（Pulmonary arterial hypertension,PAH）引起的VSMC过度增殖和血管重构有关。此外,Notch3被认为是肺动脉高压中VSMC去分化和增殖的一个重要介质[3]。Hes/Hey家族是Notch信号传导的关键下游基因[4],研究证实,Notch3过表达导致大鼠PASMCs增殖,同时Hes1转录因子表达上调[5]。Hes1转录因子可能是PASMCs中Notch3信号的重要转录靶点。因此阻断Notch3/Hes1通路,可能是治疗PPHN有价值的途径之一。西地那非是一种磷酸二酯酶-5（Phosphodiesterase-5,PDE5）抑制剂,通过抑制环鸟苷单磷酸（cyclic guanosine monophosphate,cGMP）的水解从而诱导血管舒张。吸入一氧化氮（inhaled nitric oxide,iNO）通过选择性的扩张肺部血管被广泛用于治疗PPHN,但有部分PPHN患者使用iNO治疗无效,尤其是肺实质病变和肺发育不全的患者。而西地那非能改善新生儿局部微循环,有效抑制和预防肺损伤,降低肺动脉压力,改善右心室功能。因此,当iNO无效时,西地那非可能是治疗PPHN最佳选择。目前对于Notch3/Hes1信号通路在PPHN大鼠及PASMCs中的变化和影响,未见相关报道,西地那非抗PPHN作用是否与Notch3/Hes1信号通路相关也未见报道,因此我们进行了以下研究:第一部分西地那非对PPHN大鼠肺血管重构及低氧诱导的PASMC细胞功能的影响研究目的:通过低氧（Hypoxia,Hypo）和吲哚美辛（Indometacin,Indom）诱导孕鼠建立PPHN新生大鼠模型,并且体外培养低氧诱导的新生大鼠来源的PASMCs,探讨西地那非对PPHN的作用和PPHN形成过程中对Notch3/Hes1表达的变化,揭示西地那非可以抑制PASMC增殖,降低PPHN大鼠肺血管重构及右心室肥厚指数的增加;西地那非可以降低PPHN大鼠肺组织Notch3/Hes1通路基因和蛋白表达。研究方法:1.建立Hypo+Indom诱导的PPHN大鼠模型及给药8周龄的SD大鼠,雄鼠20只,雌鼠46只,分组合笼24小时后,取雌鼠阴栓涂片检测,以在显微镜下看到精子计为孕鼠,共36只孕鼠,在大鼠妊娠第11天,选取30只随机分配为对照组、模型组、西地那非低剂量组（50mg/kg）、西地那非中剂量组（100mg/kg）、西地那非高剂量组（200mg/kg）,每组6只。对照组的孕鼠放在常氧的环境下,腹腔注射同体积的0.9%NaCl2溶液。模型组在大鼠妊娠的第19天,放于12%O2的低氧箱中饲养,箱内温度与湿度与外面环境相同,且孕鼠可自由活动,并通过腹腔注射0.5mg/kg的吲哚美辛,每天两次,连续3天。西地那非实验组在大鼠妊娠的第11天,腹腔注射不同浓度的西地那非（50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg）,1天1次,连续10天,并于妊娠第19天后与模型组接受相同处理。2.PPHN新生大鼠模型鉴定（1）右心室肥厚指数（RVHI）测定:将大鼠开胸迅速游离心脏,去除心房组织,沿心室边缘剪下右心室（RV）,分别称取右心室重量和室间隔+左心室（LV+IVS）的重量,二者重量相比RV/（LV+IVS）（mg/mg）,估测右心室肥厚指数。（2）肺血管重构评价:肺组织苏木精-伊红染色,观察肺血管形态学变化。选取各组每只新生大鼠的肺组织苏木精-伊红染色片子,分别选择直径50-200μm的肺动脉和肺小动脉,测量肺血管内外径,依照以下公式计算PAWT百分比:PAWT（%）=（外径-内径）/外径×100%3.原代PASMCs鉴定采用原代培养方法培养新生大鼠PASMCs,对细胞进行鉴定,采用α-SMA免疫荧光染色的方法。4.西地那非对培养的Hypo-PASMC增殖、迁移和凋亡的影响（1）PASMC细胞增殖和凋亡检测:MTT,流式细胞凋亡实验检测西地那非对PASMCs增殖和凋亡情况。（2）细胞周期检测:流式细胞周期实验检测西地那非对PASMCs细胞周期影响。（3）细胞迁移和侵袭检测:划痕和Transwell实验用于西地那非对PASMCs的迁移和侵袭影响的检测。5.肺组织及培养PASMC中Notch3和Hes1 mRNA表达测定通过qRT-PCR检测肺组织和Hypo-PASMCs中Notch3和Hes1 mRNA表达变化。6.大鼠肺组织及培养PASMC中Notch3和Hes1蛋白表达测定通过Western blot检测PPHN大鼠肺组织和培养Hypo-PASMCs中Notch3和Hes1蛋白表达变化。研究结果:1.PPHN动物模型鉴定及西地那非对新生PPHN大鼠肺血管重构及Notch3/Hes1通路表达的影响（1）RVHI检测结果与对照组相比,模型组RVHI显着增高,（0.23±0.03）vs（0.49±0.05）,P<0.001。与模型组相比,西地那非组显着降低了 RVHI,（0.40±0.04）or（0.36±0.03）vs（0.49±0.05）,P<0.001。（2）HE肺组织染色及PAWT结果对照组血管平滑肌细胞排列规则,内膜光滑,管腔大;模型组肺动脉的血管中膜显着增厚,PASMC肥大、增生,管腔变狭窄;与模型组相比,西地那非组,肺组织形态均有改观,肺血管中层明显变薄,血管平滑肌细胞排列规则,管腔明显变大;与对照组相比,模型组PAWT明显增加（0.30±0.04）vs（0.52±0.04）,P<0.001,西地那非可显着降低 PAWT,（0.42±0.03）or（0.38±0.06）vs（0.52±0.04）,P<0.001。（3）西地那非对新生PPHN大鼠肺组织中的Notch3和Hes1蛋白和mRNA表达影响的检测结果与对照组相比,模型组中的Notch3和Hes1蛋白和mRNA表达水平明显增加（P<0.001）;给予西地那非干预后,Notch3和Hes1蛋白和mRNA表达低于模型组（P<0.05,P<0.001）。2.原代PASMCs鉴定结果培养细胞α-SMA表达率高于97%,成功培养了原代 PASMCs。3.西地那非对培养新生大鼠Hypo-PASMCs增殖、凋亡、迁移、侵袭及Notch3/Hes1通路表达的影响。（1）培养PASMCs增殖和凋亡与对照组相比,模型组PASMCs增殖明显增强（P<0.001）,西地那非能明显抑制PASMCs增殖;模型组的PASMC凋亡比例显着减少（P<0.001）,给予西地那非干预后,凋亡细胞比例明显增多（P<0.05,P<0.01）。（2）培养PASMCs周期结果表明与对照组相比,模型组S期细胞比例增加（P<0.001）,给予西地那非干预后,S期细胞比例明显下降（P<0.05,P<0.001）。（3）PASMCs迁移和侵袭结果显示与对照组相比,模型组迁移距离、迁移面积百分比和迁移数量明显增加（P<0.001）;给予西地那非后,迁移距离、迁移面积百分比和迁移数量都较模型组减少（P<0.05,P<0.001）。（4）西地那非对PASMCs中Notch3和Hes1蛋白和mRNA表达影响的检测结果显示与对照组相比,模型组中的Notch3和Hes1蛋白和mRNA表达水平明显增加（P<0.001）;给予西地那非干预后,Notch3和Hesl蛋白和mRNA表达低于模型组（P<0.05,P<0.001）。研究结论:1.西地那非能够改善Hypo+Indom诱导的PPHN大鼠RVHI增加和肺血管重构。2.西地那非可抑制Hypo-PASMCs增殖、迁移和侵袭,促进Hypo-PASMCs凋亡。3.西地那非可以抑制体内PPHN模型中的肺组织和体外Hypo-PASMCs中的Notch3和Hes1 mRNA和蛋白的表达。第二部分西地那非通过Notch3/Hes1通路抑制低氧诱导的PASMC增殖和侵袭研究目的:采用论文第一部分原代培养由低氧诱导的新生大鼠PASMC,探讨西地那非是否通过Notch3/Hes1通路发挥抑制Hypo-PASMC增殖,从而发挥抑制肺血管重构的作用。研究方法:1.沉默Notch3通过慢病毒转染短发夹RNA（Short hairpin RNA,shRNA）到培养的Hypo-PASMCs中,敲低Notch3,检测Notch3对大鼠PASMC表达的影响。2.过表达Notch3构建Notch3过表达质粒,通过慢病毒转染到Hypo-PASMCs中,通过过表达Notch3探讨西地那非是否通过Notch3通路影响Hypo-PASMC表达。3.PASMC中Notch3和Hes1 mRNA和蛋白含量测定通过实时荧光定量RT-PCR检测和免疫印迹分析检测培养的Hypo-PASMCs中的Notch3和Hes1 mRNA和蛋白的表达。4.细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭检测MTT,流式细胞凋亡实验检测PASMC增殖和凋亡;流式细胞周期实验检测PASMC增殖周期影响;划痕和Transwell实验检测PASMCs的迁移和侵袭变化。研究结果:1.西地那非对Notch3/Hes1信号通路的影响在PASMCs中,与对照组相比,模型组中的Notch3/Hes1蛋白和mRNA表达水平明显增加（P<0.001）;给予西地那非干预后,Notch3/Hes1蛋白和mRNA表达明显低于模型组（P<0.01,P<0.001）,提示Notch3/Hes1信号通路参与了西地那非对PASMC抑制作用。2.西地那非通过Notch3/Hes1通路对PASMCs增殖、迁移、侵袭和PASMCs凋亡等的影响（1）培养PASMCs增殖和凋亡实验结果在转染Notch3 shRNA序列后,由低氧诱导的大鼠PASMCs增殖被抑制,凋亡增加,与西地那非组作用相同（P<0.001,P<0.001）:而Notch3过表达反转西地那非的抑制细胞增殖和促进凋亡作用（P<0.001）:（2）培养PASMCs流式细胞周期实验结果西地那非与Notch3 shRNA组都能够显着降低由低氧诱导的细胞S期比例升高（P<0.001）,使细胞停留在G0/G1期,而Notch3过表达组能够逆转西地那非与Notch3 shRNA的这一作用（P<0.001）;（3）PASMCs迁移和侵袭实验结果Notch3沉默组与西地那非均具有抑制PASMCs迁移和侵袭的作用（P<0.001,P<0.01）,而Notch3过表达明显减弱西地那非抑制PASMCs迁移和侵袭的作用（P<0.05）。研究结论:1.Notch3/Hes1信号通路参与了西地那非抑制低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和肺血管重构。2.西地那非通过调节Notch3/Hes1信号通路抑制PASMC增殖、迁移和侵袭,促进PASMC凋亡,从而抑制PPHN大鼠肺血管重构。

二、婴幼儿大手术后血清一氧化氮水平变化的观察（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、婴幼儿大手术后血清一氧化氮水平变化的观察（论文提纲范文）

（1）婴幼儿大手术后血清一氧化氮水平变化的观察（论文提纲范文）

（2）手术创伤后炎性细胞因子和细胞反应的临床和基础研究（论文提纲范文）

（4）肺隐球菌病并机化性肺炎1例（论文提纲范文）

（6）高压氧预处理和后处理对低压低氧环境造成的大鼠认知功能障碍的保护作用研究（论文提纲范文）

（7）阿托伐他汀对氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型中炎性因子及癫痫发作的影响（论文提纲范文）

（8）替沃扎尼对脉冲染料激光诱导的血管再生的作用及机制初探（论文提纲范文）

（9）基于NMR代谢组学方法的大鼠前交叉韧带损伤后血清代谢特征和相关机制研究（论文提纲范文）

（10）西地那非通过Notch3/Hes1通路抑制新生大鼠持续性肺动脉高压的机制研究（论文提纲范文）

四、婴幼儿大手术后血清一氧化氮水平变化的观察（论文参考文献）

• [1]婴幼儿大手术后血清一氧化氮水平变化的观察[J]. 汪健,陈易人,朱锦祥. 临床儿科杂志, 2002(12)
• [2]手术创伤后炎性细胞因子和细胞反应的临床和基础研究[D]. 汪健. 苏州大学, 2001(01)
• [3]咳嗽的诊断与治疗指南（2021）[J]. 中华医学会呼吸病学分会哮喘学组. 中华结核和呼吸杂志, 2022(01)
• [4]肺隐球菌病并机化性肺炎1例[J]. 李梦杰,李翠萍,李丽,付月强,刘鹏,王彪,周杰. 临床肺科杂志, 2021(12)
• [5]先天性心脏病患儿纠治术后急性肾损伤的研究进展[J]. 邵徽英,张马忠,郑吉建. 国际麻醉学与复苏杂志, 2021(07)
• [6]高压氧预处理和后处理对低压低氧环境造成的大鼠认知功能障碍的保护作用研究[D]. 常宇飞. 山西医科大学, 2021(01)
• [7]阿托伐他汀对氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型中炎性因子及癫痫发作的影响[D]. 冯俊祥. 新乡医学院, 2021(01)
• [8]替沃扎尼对脉冲染料激光诱导的血管再生的作用及机制初探[D]. 王冰. 吉林大学, 2021(01)
• [9]基于NMR代谢组学方法的大鼠前交叉韧带损伤后血清代谢特征和相关机制研究[D]. 李捷婷. 福建医科大学, 2021
• [10]西地那非通过Notch3/Hes1通路抑制新生大鼠持续性肺动脉高压的机制研究[D]. 康丽丽. 山东大学, 2021(11)

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