离体培养的黄瓜子叶花芽分化研究

离体培养的黄瓜子叶花芽分化研究

一、离体培养黄瓜子叶花芽分化研究(论文文献综述)

李小荟[1](2007)在《PP333处理黄瓜子叶节花芽分化、内源激素及差异蛋白组的研究》文中研究表明植物成花机理的研究是植物发育生物学研究的热点。激素在植物成花过程中起着重要的调控作用,研究植物激素作用时蛋白质的变化是植物蛋白质组学的重要内容之一。多效唑(PP333)是赤霉素的生物合成抑制剂,PP333在适宜条件下可以促进黄瓜离体子叶节花芽分化,并使多种内源激素等物质发生改变。本实验以离体黄瓜子叶节花芽分化为实验系统,应用蛋白质组学方法与技术,以及激素的测定技术,在分子水平上探讨了PP333在花芽分化过程中的作用。结果表明,PP333处理对黄瓜离体子叶节内源激素的影响是多方面的:PP333处理能显着地改变植物体IAA的含量,使子叶节在培养的初期IAA含量下降,特别在培养3天后IAA含量达最低点;PP333处理明显改变植物体内GA水平的变化动态,特别是在培养5天时会使GA水平显着升高;PP333处理提高体内ZR与ABA的含量,并且发现子叶节在培养2天后ABA水平显着升高;培养7天时对照中ZR水平会突然升高,而这一升高会被PP333处理显着抑制。总之,PP333处理不仅改变了各激素的含量和含量变化动态,也改变了不同激素间的含量对比。TIBA和PP333均可促进黄瓜离体子叶节花芽分化。用TIBA全程处理黄瓜离体子叶节成花时,最高浓度不宜高于1.0mg/L,浓度太高子叶节容易卷翘。TIBA和PP333配合处理对黄瓜离体子叶节成花率表现协同促进的效应,最佳配合浓度为TIBA0.3mg/L和PP3330.3mg/L。2-DE图谱显示黄瓜离体子叶节花芽分化过程中的蛋白质大多分布在pH 5-6间,PP333处理会引起黄瓜离体子叶节花芽分化过程中蛋白质的差异表达。在选取分析的12个蛋白点中,有4种蛋白质的丰度提高,有8种蛋白质的丰度降低。

陈继峰[2](2007)在《黄瓜离体器官再生植株研究进展》文中研究说明概述了黄瓜离体器官再生植株的途径,从离体器官(子叶、下胚轴、真叶、叶柄、幼胚、根等)获得原生质体、胚状体,然后形成植株和离体器官(子叶、真叶、茎尖)直接分化出芽或花的研究。

黄作喜,唐正义,谢寅峰,段辉国,卿东红[3](2006)在《多胺对离体黄瓜子叶花芽构建的影响》文中进行了进一步梳理研究了外源多胺对离体黄瓜(CucumissativusL.)子叶内在多胺含量和花芽构建的影响。在MS培养基中添加5×10-2mmol·L-1亚精胺(Spd)、精胺(Spm)能明显提高子叶内Spd含量和SpdPut值,子叶成花率也明显高于对照组,而添加5×10-2mmol·L-1Put、5mmol·L-1环己胺硫酸盐(CHAS)培养的结果则相反。表明子叶内Spd含量和SpdPut与成花率呈正相关关系。在添加5mmol·L-1D精氨酸(DArg)处理后,子叶内SpdPut高于Spd处理,但子叶成花率低于对照组,表明Put、Spd含量也影响离体子叶花芽的构建。在实验中添加CHAS处理后子叶内Spm含量高出对照组10倍,子叶成花率却为0,其它各处理与对照组的内源Spm变化基本一致,成花率却差别明显,表明子叶内Spm含量与黄瓜子叶花芽构建之间无明显相关性。

董倩[4](2006)在《多效唑(PP333)对黄瓜离体子叶节花芽分化的影响》文中研究说明植物成花机理的研究一直是植物发育生物学的研究热点。植物花芽分化包括生理分化和形态分化两个阶段。本文重点研究了PP333对花芽形态分化的影响。 多效唑(pacolblltrazol,PP333),属三唑类化合物,是赤霉素的生物合成抑制剂。本实验以黄瓜为材料,通过离体黄瓜子叶节直接分化花芽的实验系统,并结合植物组织化学的常规方法,研究了PP333在花芽分化进程中的作用。 结果发现,诱导黄瓜离体子叶节花芽分化的最适培养基为MS+O.3 mg/LPP333,最佳诱导时机是在去顶接种后的第一个24小时,PP333作用的最有效时间段是去顶接种后第一个6小时。所以,PP333诱导花芽分化主要是在短时间内起作用,但累积过程对花芽分化也具有促进作用。PP333促进花芽分化和形成,使直接花形成率高达40.74%,是对照的2.6倍。组织切片结果显示,PP333促进原基花启动,使花原基形成率提高了1.4倍,并且PP333降低已分化原基败育的可能性,有利于植株的正常生长。PP333处理对总原基数的形成和发生影响不大,这一点在组织水平和器官水平上的表现是一致的。 因此认为,PP333可能作用于花原基的启动阶段,促进原基分化,并对原基的正常生长发育有利。

黄作喜,陈杨利,刘清华,刘兰,蒋小莉[5](2005)在《赤霉素促进离体黄瓜子叶雄花的分化》文中提出应用MS添加1.5×10-3mmol·L-1、3.0×10-3mmol·L-1、4.5×10-3mmol·L-1、6.0×10-3 mmol·L-1GA处理离体黄瓜子叶,发现3.0×10-3mmol·L-1GA最有利于黄瓜子叶的再生株分化雄花,其 分化率占接种子叶总数的75%,始花节位为第2节。当再生株高2cm左右时是赤霉素诱导处理的最佳时机,最 适宜的品种是“新白玉”。

黄作喜,卿东红,段辉国,唐正义,王芳[6](2005)在《激动素在西葫芦子叶的花芽构建过程中促成的生理生化变化》文中研究指明报道了在激动素的影响下离体培养的西葫芦(Cucuibita pepoL.)子叶的生理生化变异及花芽的构建。结果如下在附加有激动素(KT)1.0mg.L-1的MS培养基培养的西葫芦子叶中花芽的发生率占46%,而对照组中仅达到5%。在花芽的构建过程中子叶内在的可溶蛋白,可溶糖,RNA和POD活性明显高于对照组;亚精胺(Spd)和腐胺(Put)的比值(Spd/Put)高于对照组的2倍;淀粉和DNA的含量与对照组无大的区别,但是二氨基丙烷(DAP)和尸胺(Cad)却明显下降了。由此可见在激动素影响下子叶出现的生理生化指数变化促进了花芽的构建。

李云,鄢洪强,李林,姜贤仕,邓前军,黄作喜[7](2004)在《离体培养黄瓜子叶花芽分化研究》文中指出经剥离外种皮和浸种处理,明显促进黄瓜无菌实生苗的萌芽率和整齐度提高,含琼脂0.6%的改良MS培养基有利于种子吸胀和萌芽,赤霉素处理离体黄瓜子叶不能诱导花芽分化,萘乙酸的促进作用不明显,激动素KT1.0诱导花芽分化的频率最高。

周俊辉,周家容,林毕成,丁谨[8](2004)在《6-BA和氨基酸对黄瓜子叶离体培养成花的影响》文中进行了进一步梳理在基本培养基的筛选中,1/2MS培养基中附加0.10 mg.L-1 6-BA能显着提高离体黄瓜子叶的开花率,White培养基中附加2.00 mg.L-1的KT下开花率也有明显提高,但植株矮小、瘦弱,整株变黄,甚至透明化,长势极差。浓度在一定范围的6-BA(0.010.50 mg.L-1)对黄瓜子叶开花率影响不大,但在高浓度(0.50 mg.L-1)下,植株生长势差,开花迟,低浓度(0.01 mg.L-1)下,生长势较好。相同浓度的L-丙氨酸和L-酪氨酸均明显促进黄瓜子叶开花,且开花早;而甘氨酸对黄瓜子叶开花则有一定的抑制,开花率低。

王利琳[9](2003)在《黄瓜离体子叶节花分化的生理和分子基础研究》文中认为关于成花机理的研究一直是植物发育生物学中的热点问题,也是生物学中的一个基本理论问题。成花过程包括花的诱导、花原基与花器官原基的形成以及花器官的发育等阶段,本文研究的重点是花原基与花器官原基的分化形成。本实验以黄瓜为材料,开展了黄瓜子叶离体培养物直接成花实验系统的建立和优化、成花的形态变化时程、成花的生理生化变化、运用RNA原位杂交技术分析CFL基因在花芽分化中的时空表达以及开花基因工程等方面的研究。主要研究结果如下: 1.试验了在不同pH值培养基上连续培养和预培养对离体黄瓜子叶直接形成花芽的影响。连续培养时,以pH6.5时花芽形成百分率最高,为55.0%;pH预培养时,以pH7.0预培养2d的效果最好,花芽分化率可达71.4%,并使花芽形成高峰期提前20d左右。 通过切去1/2子叶和不同长度下胚轴、调节培养基中激素配比及浓度、采用子叶节培养等进一步的试验发现,三碘苯甲酸(TIBA)和多效唑(PP333)极显着地协同促进完全切除下胚轴的黄瓜离体子叶节直接成花,TIBA与PP333相配合的最适浓度为1.0~1.5mg/L,直接成花率高达90%。这一实验系统操作简单、周期短、成花率高、重复性好,为后续研究奠定了基础。 2.对黄瓜0~7d幼苗及去顶后在诱花和诱芽培养基上培养0~8d的子叶节进行了系统的石蜡切片观察,未发现0~7d幼苗的子叶叶腋存在明显的潜伏芽。去顶后1~2d在子叶叶柄基部与切口之间的表皮下细胞分裂形成突起,去顶后6d诱花与诱芽的突起表现出形态差异,诱花子叶节突起的上端变钝,而诱芽子叶节突起的上端成尖锥状。去顶后8d诱花子叶节分化形成完整的花芽。扫描电镜观察证实,去顶后3d可见原基突起,4d原基出现二次突起,6d时即可区分出花芽和营养芽之间的形态差异。通过上述观察,明确了黄瓜子叶节花芽分化的形态时程。 3.通过在有Ca2+和无Ca2+培养基上进行转换试验,发现黄瓜子叶节离体培浙江大学博士学位论文中文摘要养物花分化过程中存在C扩+敏感期。子叶节在无C扩+培养基中分别培养。、1、2、3、4、5、6d后,转入含6llun。比CaC12的培养基中培养24h,再转回到无c扩干培养基继续培养。结果表明在无caz+培养基中培养冬3d后,进行24 h Caz+脉冲处理显着增加子叶节的花芽分化率,其中以无C扩+培养4d后C扩+脉冲处理的效果最为明显,花芽分化率达34.3%。认为黄瓜子叶节离体培养O碑d是花分化的c扩+作用敏感期。 用高效液相色谱法(HPLC)测定了黄瓜子叶节花芽分化期(0一6d)内源激素及多胺的变化。结果显示,子叶培养O一Zd生长素(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)、脱落酸(ABA)等4种内源激素均明显下降,4一sd略有上升,表明O2 d IAA、G与和ABA的剧降有利于花原基形成,3一sd较高的ZT含量有利于花器官原基的形成。除腐胺(Put)外,精胺(Spm)、亚精胺(spd)、尸胺(Cad)在O一ld均下降,1碎d上升,4一sd再下降,Put在0-ld急剧上升,而后持续下降,表明高水平的内源多胺总量和Put可能有利于花原基分化,Zd后Spm含量上升有利于花器官原基分化,而Cad含量变化可能是区别花芽和营养芽分化的特征之一。 4.首次利用RNA原位杂交技术,研究了LFY同源基因—C万艺基因在黄瓜花芽分化和营养芽分化及形成中的表达模式。结果显示:去顶培养3d后,CF艺基因首先表达于原基顶端;4d后表达增强,表达范围扩展到原基中心区域:sd一6d,CF’L基因强表达于整个花原基、花器官原基或叶原基;7d后,CF’L基因仅表达于花瓣和雄蕊,或叶腋原基和最幼嫩叶原基,表达强度也减弱:在成熟组织中没有检测到CF艺基因的表达。结果说明CF艺基因在黄瓜营养性分生组织、叶原基、花分生组织和花器官原基形成之初发挥重要作用,在花原基和花器官原基形成时表达最强;仅靠CF艺基因的杂交信号不能确认原位组织具有花属性,但是,花分生组织属性的获得、花器官原基的启动确实需要有CFL基因的表达。 5.通过基因工程方法将C万Z基因异源导入大岩桐,期望得到提早开花的转基因新品种,为控制重要的粮食作物和名贵花卉的开花时间提供实验依据,国内外还不多见。利用pBC KS十质粒载体上的Smal和Sacl酶切位点,将CFz基因成功克隆到表达载体pBI 1 21(含CaMv35S启动子)上,命名为pBI一cfl。通过根癌农杆菌 EHA105介导,叶盘法转化大岩桐,经过抗性压力筛选、诱浙江大学博士学位论文 中文摘要导分化后,共获得45株再生植株。经过PCR检测、DNA点杂交和PCR一Southern杂交表明,目的基因已经整合到大岩桐基因组中。目前,对转CFL基因再生植株的Northern杂交、开花性状表现、生理生化分析和后代遗传行为的观察和研究正在进行之中。

孔海燕,贾桂霞,温跃戈[10](2003)在《钙在植物花发育过程中的作用》文中研究表明对于园林观赏植物 ,开花是一个非常重要的发育阶段 ,它直接影响花卉的品质。近年来 ,植物花发育的分子生物学研究进展迅速 ,并取得了一些突破性成果。钙作为第二信使在植物信号转导中起着非常重要的作用 ,大量研究显示 ,钙有可能参与开花控制。本文总结了钙信号与植物花发育这一领域的最新研究进展 ,包括以下几个方面的内容 :钙在植物成花诱导 (包括光周期诱导和低温诱导 )中的作用 ;花芽分化时期钙在植物叶芽和花芽中的动态分布及组织培养条件下不同钙浓度对花芽分化的影响 ;钙与花衰老的关系

二、离体培养黄瓜子叶花芽分化研究(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、离体培养黄瓜子叶花芽分化研究(论文提纲范文)

(1)PP333处理黄瓜子叶节花芽分化、内源激素及差异蛋白组的研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
中文文摘
第1章 绪论
    1.1 蛋白质组学研究方法
        1.1.1 蛋白质组与蛋白质组学
        1.1.2 蛋白质组学的研究内容
        1.1.3 蛋白质组学的产生背景
        1.1.4 蛋白质组学研究的主要技术
        1.1.4.1 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)--蛋白质分离的核心技术
        1.1.4.2 质谱技术--蛋白质鉴定的主要手段
        1.1.4.3 其他蛋白质组学研究技术
        1.1.4.4 蛋白质组数据库(Proteome data base)
    1.2 植物蛋白质组学研究
        1.2.1 植物蛋白质组学的发展
        1.2.1.1 双向电泳技术在植物蛋白质组研究中的应用
        1.2.1.2 差异蛋白质组学在植物蛋白质组研究中的应用
        1.2.1.3 激素引起的植物差异蛋白质组学相关研究
        1.2.1.4 其他方面引起的植物差异蛋白质组学研究
        1.2.2 植物蛋白质组数据库
    1.3 本课题研究的内容和意义
第2章 PP_(333)处理黄瓜子叶节花芽分化过程中内源激素的研究
    2.1 前言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 材料、药品与条件
        2.2.2 育苗与接种
        2.2.3 PP_(333)处理
        2.2.4 样品中激素的提取与含量的测定
    2.3 结果与分析
        2.3.1 PP_(333)处理黄瓜离体子叶节花芽分化过程中IAA的动态变化
        2.3.2 PP_(333)处理黄瓜离体子叶节花芽分化过程中GA的动态变化
        2.3.3 PP_(333)处理黄瓜离体子叶节花芽分化过程中ZR的动态变化
        2.3.4 PP_(333)处理黄瓜离体子叶节花芽分化过程中ABA的动态变化
    2.4 讨论
第3章 TIBA和PP_(333)处理对黄瓜离体子叶节花芽分化的影响
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 材料、药品与条件
        3.2.2 育苗与接种
        3.2.3 TIBA全程处理
        3.2.4 TIBA与PP_(333)全程处理
        3.2.5 结果与分析
        3.2.5.1 TIBA全程处理对黄瓜子叶节花芽分化的影响
        3.2.5.2 TIBA与PP_(333)配合处理对黄瓜子叶节花芽分化的影响
    3.3 讨论
第4章 PP_(333)处理黄瓜离体子叶节花芽分化的差异蛋白分析
    4.1 前言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 组织培养材料
        4.2.1.1 材料、条件和药品
        4.2.1.2 方法
        4.2.2 双向电泳材料与方法
        4.2.2.1 生化试剂
        4.2.2.2 主要仪器
        4.2.2.3 溶液配制
        4.2.2.4 蛋白干粉的制备
        4.2.2.5 样品的溶解
        4.2.2.6 蛋白质标准曲线绘制
        4.2.2.7 样品液浓度的测定
        4.2.2.8 第一向:固相pH梯度等电聚焦(IEF)
        4.2.2.9 胶条平衡
        4.2.2.10 第二向: SDS-PAGE电泳
        4.2.2.11 二维凝胶电泳分析
    4.3 结果与分析
        4.3.1 蛋白质含量标准曲线
        4.3.2 SDS-PAGE分离胶浓度的选择
        4.3.3 IEF胶条pH的选择
        4.3.4 两性电解质pH范围的选择
        4.3.5 上样量的选择
        4.3.6 PP_(333)处理黄瓜离体子叶节差异蛋白的分析
    4.4 讨论
        4.4.1 样品制备
        4.4.2 2-DE图谱的清晰度与分辨率
        4.4.2.1 样品溶剂的影响
        4.4.2.2 SDS电泳的影响
        4.4.2.3 染色
        4.4.2.4 差异蛋白与花芽分化
结论
附录
参考文献
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果
致谢
个人简历

(2)黄瓜离体器官再生植株研究进展(论文提纲范文)

1 再生植株途径
    1.1 原生质体途径
        1.1.1 子叶为材料
        1.1.2 下胚轴或真叶为材料
        1.1.3 叶柄、胚或根为材料
        1.1.4 影响无性胚发生的因素
    1.2 离体器官直接分化芽或花的研究
2 黄瓜离体研究中存在的问题与展望

(4)多效唑(PP333)对黄瓜离体子叶节花芽分化的影响(论文提纲范文)

摘要
Abstract
中文文摘
第1章 绪论
    1.1 成花在植物生命周期中具有重要意义
    1.2 立题背景和意义
第2章 PP_(333)处理对黄瓜子叶节培养物花芽分化的影响
    2.1 前言
    2.2 材料与方法
    2.3 结果与分析
    2.4 讨论
第3章 PP_(333)处理黄瓜子叶节培养物的组织学研究
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
    3.3 结果与分析
    3.4 讨论
结论
参考文献
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果
致谢
个人简历
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(5)赤霉素促进离体黄瓜子叶雄花的分化(论文提纲范文)

1 材料、方法
    1.1 材料
    1.2 方法
2 结果
    2.1 种子萌发
    2.2 再生株萌发和生长
    2.3 赤霉素诱导黄瓜子叶雄花的分化
3 讨论

(6)激动素在西葫芦子叶的花芽构建过程中促成的生理生化变化(论文提纲范文)

1 材料与方法
2 结果与分析
    2.1 KT1.0处理对西葫芦子叶花芽构建时可溶性糖、淀粉含量的影响
    2.2 KT1.0处理对西葫芦子叶花芽构建时可溶性蛋白质含量的影响
    2.3 KT1.0处理对西葫芦子叶花芽构建时POD活性的影响
    2.4 KT1.0处理对西葫芦子叶花芽构建时DNA、RNA含量的影响
    2.5 KT1.0处理对西葫芦子叶花芽构建时多胺含量的影响
3 讨论

(7)离体培养黄瓜子叶花芽分化研究(论文提纲范文)

1 材料、方法
2 结果
    2.1 无菌黄瓜实生苗的培养
        2.1.1 剥离外种皮
        2.1.2 浸种处理
        2.1.3 改良MS培养基
    2.2 外源激素处理诱导离体黄瓜子叶花芽分化
3 讨论

(8)6-BA和氨基酸对黄瓜子叶离体培养成花的影响(论文提纲范文)

材料与方法
结果与讨论
    1离体子叶开花过程中的形态变化
    2不同基本培养基对黄瓜子叶开花的影响
    3不同浓度6-BA对黄瓜子叶开花的影响
    4不同氨基酸对黄瓜子叶开花的影响

(9)黄瓜离体子叶节花分化的生理和分子基础研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 引言
    2 高等植物成花的生理学研究进展
        2.1 温度
        2.2 激素
        2.3 多胺
        2.4 钙离子
    3 高等植物成花的分子机理研究进展
        3.1 开花时间基因(Flowering time gene)
        3.2 花分生组织特征基因(Floral meristem identity gene)
        3.3 花器官特征基因(Floral organ identity gene)
    4 LFY基因在花启动和花发育中的作用
        4.1 LFY基因的时空表达和阈值
        4.2 LFY基因在成花各阶段中的作用
        4.3 LFY基因表达的基因调控网络
        4.4 影响LFY基因表达的生理因子
        4.4.1 生长素(IAA)
        4.4.2 赤霉素(GAs)
        4.4.3 细胞分裂素(CTKs)
        4.4.4 脱落酸(ABA)
        4.4.5 乙烯(Eth)
        4.4.6 蔗糖(Sucrose)
        4.4.7 昼夜节律性(circadian rhythm)
    5 展望
第二章 黄瓜子叶培养物成花实验系统的建立和优化
    第一节 培养基pH对离体黄瓜子叶形成花芽的影响
        1 材料与方法
        2 结果与分析
        2.1 培养基灭菌后培养期间的pH变化
        2.2 不同pH值培养基对花芽形成的影响
        2.3 不同pH值培养基预培养对花芽形成的影响
        3 讨论
    第二节 三碘苯甲酸和多效唑对黄瓜去顶苗直接成花的协同促进效应和作用部位
        1 材料与方法
        2 结果与分析
        2.1 TIBA和PP333相配合对黄瓜去顶苗成花的影响
        2.2 不同浓度TIBA对黄瓜去顶苗直接成花的影响
        2.3 下胚轴长度对TIBA促进成花的效应
        3 讨论
第三章 黄瓜子叶培养物花芽分化过程中的形态变化
    1 材料与方法
        1.1 育苗与接种
        1.2 材料准备
    2 结果与分析
        2.1 0~7天苗子叶节的石蜡切片观察
        2.2 去顶后0~8天苗子叶节的石蜡切片观察
        2.3 去顶后0~6天苗子叶节的电镜扫描观察
    3 讨论
第四章 黄瓜子叶节离体培养物花芽分化的生理学研究
    第一节 离体黄瓜子叶节花芽分化与内源激素及多胺的关系
        1 材料与方法
        1.1 育苗、分化培养与取样
        1.2 内源激素含量测定
        1.3 内源多胺含量的测定
        2 结果与分析
        2.1 花芽分化过程中内源激素含量变化
        2.2 花芽分化过程中内源多胺含量变化
        3 讨论
    第二节 黄瓜子叶节离体培养物花分化Ca~(2+)敏感期的研究
        1 材料与方法
        2 结果与分析
        2.1 离体培养黄瓜子叶节的花芽和营养芽分化过程
        2.2 培养1~7d期间CaCl_2脉冲处理对花芽分化的影响
        3 讨论
第五章 黄瓜CFL基因在花芽和营养芽形成中的时空表达
    1 材料与方法
        1.1 育苗、分化培养与取样
        1.2 材料固定、脱水、包埋与切片
        1.3 RNA探针合成与标记
        1.3.1 CFL基因中3′端片段的PCR扩增
        1.3.2 转录模板线性化
        1.3.3 RNA探针的地高辛标记
        1.3.4 RNA探针的检测
        1.4 杂交
        1.4.1 材料预处理
        1.4.2 杂交
        1.4.3 冲洗
        1.4.4 抗体染色
        1.4.5 荧光显色
    2 结果与分析
        2.1 通过PCR扩增得到CFL基因中3′端目的片段
        2.2 目的片段的克隆及鉴定
        2.3 反义和正义RNA探针的制备
        2.4 RNA原位杂交分析CFL基因在黄瓜花芽分化中的时空表达
        2.4.1 诱花培养基上不同培养时期子叶节切片原位杂交结果
        2.4.2 诱芽培养基上不同培养时期子叶节切片原位杂交结果
    3 讨论
第六章 农杆菌介导的黄瓜CFL基因转化大岩桐的研究
    1 材料与方法
        1.1 植物表达载体的构建
        1.2 农杆菌介导的大岩桐的遗传转化
        1.2.1 植物材料
        1.2.2 农杆菌菌株
        1.2.3 主要试剂
        1.2.4 操作步骤
        1.3 转基因植株的检测
        1.3.1 基因组DNA的提取
        1.3.2 转基因植株的PCR检测
        1.3.3 转基因植株的PCR-Southern杂交检测
        1.3.4 转基因植株的DNA斑点杂交检测
    2 结果与分析
        2.1 pBC-cfl质粒的鉴定
        2.2 CFL基因植物表达载体的构建
        2.3 农杆菌介导的CFL转化大岩桐
        2.4 再生植株的分子检测
    3 讨论
结束语与展望
参考文献
致谢
附录: 在读博士学位期间主要科研业绩

四、离体培养黄瓜子叶花芽分化研究(论文参考文献)

  • [1]PP333处理黄瓜子叶节花芽分化、内源激素及差异蛋白组的研究[D]. 李小荟. 福建师范大学, 2007(06)
  • [2]黄瓜离体器官再生植株研究进展[J]. 陈继峰. 上海农业学报, 2007(01)
  • [3]多胺对离体黄瓜子叶花芽构建的影响[J]. 黄作喜,唐正义,谢寅峰,段辉国,卿东红. 云南植物研究, 2006(02)
  • [4]多效唑(PP333)对黄瓜离体子叶节花芽分化的影响[D]. 董倩. 福建师范大学, 2006(01)
  • [5]赤霉素促进离体黄瓜子叶雄花的分化[J]. 黄作喜,陈杨利,刘清华,刘兰,蒋小莉. 内江师范学院学报, 2005(06)
  • [6]激动素在西葫芦子叶的花芽构建过程中促成的生理生化变化[J]. 黄作喜,卿东红,段辉国,唐正义,王芳. 云南植物研究, 2005(06)
  • [7]离体培养黄瓜子叶花芽分化研究[J]. 李云,鄢洪强,李林,姜贤仕,邓前军,黄作喜. 内江师范学院学报, 2004(06)
  • [8]6-BA和氨基酸对黄瓜子叶离体培养成花的影响[J]. 周俊辉,周家容,林毕成,丁谨. 植物生理学通讯, 2004(02)
  • [9]黄瓜离体子叶节花分化的生理和分子基础研究[D]. 王利琳. 浙江大学, 2003(04)
  • [10]钙在植物花发育过程中的作用[J]. 孔海燕,贾桂霞,温跃戈. 植物学通报, 2003(02)

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离体培养的黄瓜子叶花芽分化研究
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