一、bcl-2基因家族在喉鳞癌组织中的表达及意义（论文文献综述）
吕洁瑜[1]（2021）在《过表达HOXC11通过调控PPAE-γ和NF-κB通路促进头颈部鳞癌增殖和侵袭的研究》文中提出研究背景同源盒（Homeobox,HOX）基因家族的异常表达常见于多种恶性肿瘤中,已有研究显示,HOXC11在多种肿瘤中异常高表达并参与了癌细胞的恶性生物学行为,被认为是一个具有潜在临床诊断价值的生物标志物。然而,HOXC11在头颈部鳞癌的表达及与临床的相关性依然不清,其是否参与头颈部鳞癌的恶性生物学行为以及具体的调控机制也有待研究。研究目的（1）观察HOXC11在头颈部鳞癌组织中的表达情况,分析HOXC11的表达与患者临床病理及预后的相关性。（2）探索HOXC11对头颈部鳞癌细胞体内与体外恶性生物学特征的影响。（3）阐明HOXC11参与头颈部鳞癌恶性生物学行为的相关分子机制。研究内容与方法（1）HOXC11在头颈部鳞癌的表达及其临床意义结合肿瘤基因组图谱（TCGA）的数据,利用实时荧光定量PCR、免疫蛋白印迹、免疫组织化学等方法,检测HOXC11在头颈部鳞癌组织中RNA和蛋白的表达情况,分析HOXC11的表达与患者临床病理及预后的相关性。（2）沉默HOXC11对头颈鳞癌细胞恶性生物学行为的影响利用shRNA技术在HOXC11高表达的头颈部鳞癌细胞（SCC15和SCC152）中,构建稳定沉默HOXC11的细胞模型。通过CCK-8实验、克隆形成实验、Transwell侵袭实验、软琼脂克隆形成实验和裸鼠皮下移植成瘤实验,观察HOXC11对头颈部鳞癌细胞的增殖、侵袭和成瘤性等恶性生物学特征的影响。（3）沉默HOXC11对头颈部鳞癌细胞信号通路的影响利用双荧光素酶报告基因实验、免疫印迹实验和实时荧光定量PCR等技术,观察在头颈肿瘤鳞癌细胞中,沉默HOXC11后对NF-κB通路和PPAR-γ通路的影响。同时,利用临床样本的免疫组化检测及分析,验证HOXC11、PPAR-y和NF-κB在临床组织中的表达情况及其相关性。研究结果（1）相对于良性病变或癌旁正常对照组织,头颈部鳞癌组织中HOXC11的mRNA和蛋白水平都显着高表达,且表达水平随T分期上升而上调;预后分析显示,HOXC11的高表达与患者预后差相关,癌组织中高表达HOXC11的患者更容易复发。（2）沉默HOXC11后,头颈部鳞癌细胞（SCC15和SCC152）体外的增殖、侵袭和非锚定生长能力都显着受到抑制;且体内实验显示,沉默SCC15细胞能显着抑制皮下瘤的生长和对周围组织的侵袭。（3）在头颈部鳞癌细胞中,沉默HOXC11能显着抑制NF-κB通路并激活PPAR-γ通路,并影响下游增殖和侵袭相关基因的表达;且头颈部鳞癌组织中,HOXC11的表达与PPAR-y的表达负相关而与p65的核定位水平正相关。研究结论HOXC11在头颈部鳞癌中高表达,并与患者复发及预后较差相关,是预判头颈部鳞癌患者预后的潜在生物标志物。沉默HOXC11能影响NF-κB通路和PPAR-γ通路,抑制头颈部鳞癌细胞增殖、侵袭和体内成瘤,是潜在的治疗靶点。
张津京[2]（2021）在《转录因子FOXN3在急性髓系白血病中的作用及其致病机制研究》文中提出目的:急性髓系白血病（acute myeloid leukaemia,AML）是成人白血病中最常见的类型,其主要特征是白血病细胞增殖失控、分化障碍、凋亡受阻,大量的白血病细胞在骨髓和其他造血组织中蓄积,从而导致正常造血细胞减少及白血病细胞浸润其他组织器官。大多数AML患者的病因不明,已知与该病发生相关的因素包括遗传因素、电离辐射、理化因素和化疗药物等。尽管AML的治疗已经取得了较大的进展,但是仍有60%-80%的AML患者无法治愈,最终因耐药或疾病复发而死亡。因此,深入研究AML的发病机制,寻找AML治疗的新靶点一直是亟需解决的医学难题。随着细胞遗传学和分子生物学的发展,目前认为染色体数目或结构异常、基因突变或者基因表达水平的异常是导致细胞过度增殖、分化受阻或凋亡受抑等AML发生的主要机制。近年来研究显示,转录因子介导的靶基因的转录异常,导致靶基因及其下游的信号转导通路异常,可以促进AML细胞的恶性转化,并且有可能成为AML潜在的治疗靶点。FOXN3（forkhead box N3）,又名CHES1（checkpoint suppressor 1）,属于转录因子叉头框（forkhead box,FOX）蛋白家族FOXN亚类中的一种亚型。目前研究表明,FOXN3可以参与体内多种生物学过程如细胞周期、细胞分化、上皮间质转化、调节基因转录、参与糖代谢等。既往研究显示,FOXN3的表达水平在包括肝细胞癌、肺癌、结肠癌、前列腺癌、喉癌、多形性胶质母细胞瘤及淋巴瘤等多种恶性肿瘤中有明显的下调,并且其表达量的下调可以促进肿瘤的发生、发展,这提示FOXN3可能是重要的肿瘤抑制基因。然而,FOXN3表达下调的致癌机制目前尚不完全清楚。一方面,FOXN3作为转录抑制因子,能够直接与癌基因的启动子结合抑制癌基因的转录而发挥抑制肿瘤的作用。另一方面,FOXN3蛋白能够与多种蛋白相互结合而发挥作用。但是,对于FOXN3在AML中的生物学功能目前还知之甚少。E2F转录因子5（E2F transcription factor 5,E2F5）属于E2F转录因子家族成员,大量的研究显示E2F家族可以调控细胞增殖,在细胞周期调节、DNA损伤修复及发育中均发挥重要作用。E2F5在肝癌、前列腺癌、卵巢癌、食管癌等多种实体肿瘤中发挥癌基因的作用,并且与化疗的敏感性相关。据我们所知,既往仅有1篇研究应用c DNA芯片检测发现E2F5在AML中的表达较正常对照是增高的,然而E2F5在AML中的生物学功能国内外未见相关报道。尽管我们课题组在前期研究中发现FOXN3在成人AML中表达减低,但其与临床参数如基因突变及预后的相关性未做全面详细的研究。因此,本研究通过扩大样本量旨在验证转录因子FOXN3在成人AML中表达水平的下调,并全面分析其表达水平与临床各参数的相关性并明确其预后意义。初步研究FOXN3在AML中的生物学功能并探索其可能的致癌机制,寻找其下游靶基因,为确定FOXN3能够成为AML新的肿瘤标志物及治疗新靶点提供重要的理论基础和依据。研究方法:1.FOXN3在AML患者中的表达及临床意义:收集117例初诊成人AML患者及25例正常对照的骨髓标本,及与初诊标本配对的完全缓解后复治标本34例。提取骨髓单个核细胞,提取RNA,反转录成c DNA,应用实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR）的方法检测FOXN3 m RNA的表达水平。部分标本提取骨髓单个核细胞后,甩片,应用免疫组化的方法检测FOXN3蛋白的表达水平。应用在线公共数据库Bloodspot比较AML与造血干细胞（hematopoietic stem cells,HSCs）中FOXN3表达的差异。收集117例初诊成人AML患者的临床资料,如年龄、性别、白细胞数、血红蛋白、血小板、染色体核型、基因突变结果、治疗方案及生存数据等。按FOXN3的中位表达水平将117例患者分为低表达组和高表达组,比较两组患者临床资料的差异。2.FOXN3在AML细胞系中的生物学功能的研究:培养AML细胞系THP1、Kasumi1、U937、HL60及人胚胎上皮细胞293T细胞株。应用RT-q PCR及蛋白免疫印迹（Western blot）检测上述细胞系中FOXN3 m RNA及蛋白的表达水平。在细胞系Kasumi1及THP1中转染FOXN3过表达慢病毒及沉默慢病毒作为实验组,同时设置转染空载慢病毒作为阴性对照组及不转任何病毒的空白对照组。应用RT-q PCR及Western blot验证转染效率。应用CCK-8检测FOXN3过表达/敲减实验组、阴性对照组及空白对照组增殖能力的变化,应用流式细胞术检测FOXN3过表达/敲减实验组、阴性对照组及空白对照组细胞周期及细胞凋亡的变化。3.FOXN3在AML中的分子机制研究:在细胞系THP1中应用染色质免疫共沉淀-高通量测序技术（chromatin immunoprecipitation sequencing,Ch IP-seq）得到FOXN3可能调控的靶基因,应用GO分析和KEGG pathway分析了解FOXN3调控的靶基因参与的生物学过程及信号通路。进一步应用RT-q PCR及Western blot在阴性对照组和FOXN3过表达实验组中筛选下游靶基因。应用Jaspar在线预测软件预测并用染色质免疫共沉淀（Ch IP-PCR）及双荧光素酶报告基因验证E2F5是FOXN3直接转录调控的下游靶基因。培养AML细胞系THP1、Kasumi1、K562及人胚胎上皮细胞293T细胞株。应用RT-q PCR检测上述细胞系中及患者骨髓标本中E2F5 m RNA的表达水平。应用在线公共数据库Bloodspot比较AML与HSCs中E2F5表达的差异及其预后意义。在细胞系Kasumi1及THP1中转染E2F5沉默慢病毒作为敲减实验组,同时设置转染空载慢病毒的阴性对照组。应用RT-q PCR及Western blot验证转染效率。应用CCK-8检测E2F5敲减实验组及阴性对照组增殖能力的变化,应用流式细胞术检测E2F5敲减实验组及阴性对照组细胞周期及细胞凋亡的变化,应用Western blot检测两组中PCNA、Bcl-2、cyclin D1、CDK6、CDK2、cyclin E1的表达。在细胞系Kasumi1及THP1中转染FOXN3过表达慢病毒及E2F5过表达慢病毒作为共转染实验组,同时设置转染FOXN3过表达慢病毒作为阴性对照组及转染空载慢病毒作为空白对照组,应用RT-q PCR及Western blot验证转染效率。应用CCK-8检测实验组与阴性对照组及空白对照组增殖能力的变化,应用流式细胞术检测实验组与阴性对照组及空白对照组细胞周期及细胞凋亡的变化。应用RNA-测序（RNA-sequencing,RNA-seq）检测过表达FOXN3后基因表达谱的变化并对差异基因进行GO分析及KEGG分析。应用Western blot检测共转染实验组、阴性对照组及空白对照组中PCNA、Bcl-2、cyclin D1、CDK6、CDK2、cyclin E1、EZH2、ERK及p-ERK的表达。4.统计学方法:计量资料采用平均值±标准差来表示。统计数据应用Graph Pad Prism 7.0a软件和SPSS 15.1软件进行统计分析。两组间数据比较应用MannWhitney检验,多组间数据比较应用one-way analysis of variance（ANOVA）分析。率的比较应用卡方检验。FOXN3对生存的影响应用生存分析,差异性比较应用log-rank检验。应用Cox风险评估模型进行单因素和多因素分析。统计结果以P<0.05认为差异有统计学意义。结果:1.FOXN3在初诊AML中表达降低的临床意义。1.1 FOXN3在初诊AML中表达降低（m RNA和蛋白水平）,且在完全缓解后表达上调。FOXN3的表达在AML中显着低于HSCs。1.2 FOXN3低表达与高龄及高白细胞具有显着的相关性。而与性别、血红蛋白、血小板、FAB分型、染色体核型、基因突变等无明显相关性。FOXN3低表达的患者完全缓解（complete remission,CR）率低于高表达患者,总生存期（overall survival,OS）差于高表达患者。在年龄低于60岁患者中FOXN3低表达患者的无复发生存期（relapse free survival,RFS）明显短于高表达者。单因素及多因素分析发现FOXN3表达水平是AML预后的独立影响因子。2.FOXN3在AML细胞系中的生物学功能的研究。2.1 AML细胞系中FOXN3的表达低于正常对照。2.2在AML细胞系Kasumi1及THP1中转染FOXN3过表达慢病毒,RT-q PCR及Western blot检测FOXN3 m RNA和蛋白水平较前明显升高。在Kasumi1及THP1中转染FOXN3沉默慢病毒,RT-q PCR及Western blot检测FOXN3 m RNA和蛋白水平较前明显下降。2.3在AML细胞系THP1和Kasumi1中,过表达FOXN3可以使G0-G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少,细胞周期发生G0-G1期阻滞;抑制细胞增殖;细胞凋亡增加。敲减FOXN3可以使G0-G1期细胞明显减少,S期细胞明显增多,促进细胞周期进程;促进细胞增殖。3.FOXN3在AML中通过靶向转录调控E2F5下调MAPK通路发挥肿瘤抑制作用。3.1 Ch IP-Seq初筛转录因子FOXN3的靶基因:应用CHIP-seq识别FOXN3调控的潜在下游靶基因,共获得205115个FOXN3潜在结合位点。这些潜在调控位点有2.49%位于启动子,1.47%位于外显子,33.09%位于内含子,11.09%位于启动子上游。通过比对基因组,识别了5719个FOXN3潜在调控的靶基因。经过对基因进行注释（gene ontology,GO）分析发现这些基因在细胞周期阻滞、凋亡调控、器官发育、应激等生物学过程中明显富集。同时,代谢通路（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathway,KEGG pathway）富集发现其共同参与的通路包括细胞周期、粘附功能、半乳糖代谢等。3.2对靶基因进行筛选验证:应用RT-q PCR检测筛选发现CDC42、E2F5、HDAC1的表达在过表达FOXN3组中显着低于阴性对照组。Western blot结果显示E2F5及CDC42蛋白表达水平在过表达FOXN3组中显着低于阴性对照组。3.3确定E2F5是FOXN3直接转录抑制的靶基因:应用Jaspar在线预测软件发现E2F5启动子区域有FOXN3结合的潜在结合位点。应用Ch IP-PCR及双荧光素酶报告基因发现FOXN3直接结合在E2F5的启动子上并抑制其转录活性。3.4 E2F5是新型的AML癌基因:E2F5的表达在AML中显着高于HSCs,在初诊AML患者中表达较对照组升高,在AML细胞系中的表达高于正常对照细胞系。在Kasumi1及THP1中转染E2F5沉默慢病毒,RT-q PCR及Western blot检测E2F5 m RNA和蛋白水平较阴性对照组明显降低。敲减E2F5可以抑制细胞周期进程,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖,这与在AML细胞系中过表达FOXN3后的生物学效应一致。Western blot结果提示敲减E2F5后,PCNA、Bcl-2、cyclin D1、CDK6、CDK2、cyclin E1的表达明显下调。3.5 FOXN3通过靶向下调E2F5发挥肿瘤抑制作用:在AML细胞系THP1和Kasumi1中,过表达E2F5可以显着恢复FOXN3过表达对细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。Western blot结果显示过表达E2F5可以显着恢复FOXN3过表达对PCNA、Bcl-2、cyclin D1、CDK6、CDK2、cyclin E1的下调作用。3.6 FOXN3-E2F5-EZH2-MAPK信号通路的确立:过表达FOXN3后,发现181个基因表达发生显着变化（94个明显下调、87个明显上调）,这些差异基因经GO分析主要集中在转录调控、细胞周期、细胞凋亡、细胞增殖等生物学过程中,KEGG pathway富集发现其共同参与的通路包括MAPK信号通路、Erb B信号通路、NF-kappa B信号通路等。Western blot结果显示过表达E2F5可以显着恢复FOXN3过表达对EZH2及p-ERK的下调作用,而ERK无明显变化。结论:1.FOXN3在成人AML患者及AML细胞系中的表达水平均较正常对照组明显降低。且FOXN3低表达与高龄及高白细胞具有相关性,CR率更低,预后差。FOXN3的表达水平是AML预后的独立影响因子。2.在AML细胞系中,过表达FOXN3可以使细胞周期发生阻滞,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡;敲减FOXN3可以促进细胞周期进程,促进细胞增殖。3.在AML中,E2F5是FOXN3直接转录抑制的靶基因。E2F5是新型的AML癌基因,敲减E2F5可以引起细胞周期阻滞,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖。在AML中FOXN3通过FOXN3-E2F5-EZH2-MAPK调控轴发挥肿瘤抑制作用。
罗敏[3]（2020）在《MiR-196b靶向PCDH-17调控人喉鳞状细胞癌进展的机制研究》文中研究说明第一部分:miR-196b、PCDH-17表达在人喉鳞状细胞癌中的差异性表达及与患者预后关联性分析目的:探究miR-196b、PCDH-17在人喉鳞状细胞癌及癌旁正常组织中的差异性表达,确定其促癌性或抑癌性,分析miR-196b、PCDH-17与患者预后关系。材料与方法:选取2010年6月到2013年6月在我院经病理诊断确诊为人喉鳞癌并且进行手术的79例患者癌组织及癌旁正常组织;患者的肿瘤淋巴结转移（TNM）分期按照国际癌症控制联盟（UICC）和美国癌症联合委员会（AJCC）共同制定的AJCC/UICC第8版头颈部肿瘤分期标准。统计79例患者的一般社会学资料、临床病理资料;免疫组织化学染色分析癌组织及癌旁组织中PCDH-17蛋白阳性表达;RT-PCR检测人喉鳞癌及癌旁组织中miR-196b、PCDH-17 m RNA浓度表达;确定miR-196b、PCDH-17 m RNA表达的相关性;对79例患者随访五年,统计患者生存率,miR-196b、PCDH-17 m RNA表达与患者预后关联性分析。结果:一般临床资料分析:患者的平均年龄为60.58±14.25岁;男性患者占据大多数比例;喉鳞癌患者伴随较高比例的吸烟史及酗酒史,组织学分级I级比例最低,II级和III级比例数据差异性较小;T1分期比较最低,T2T4分期比例差异性较小;N0分期占据绝大多数比例,TNM的分期体现出相同的趋势,其中I期比例最低,IIIV期比例差异性较小;RT-PCR检测喉鳞癌及癌旁组织中miR-196b及PCDH-17的m RNA表达:喉鳞癌组织内miR-196b的表达要明显的高于癌旁正常组织,体现出明显促癌性特点;PCDH-17的表达要明显地低于癌旁正常组织,体现出抑癌性特点;两组数据相比,差异有显着统计学意义（P<0.05）;免疫组织化学染色检测喉鳞癌及癌旁组织中PCDH-17蛋白阳性率表达:癌组织内PCDH-17蛋白的阳性表达率明显地低于癌旁正常组织,数据差异有显着统计学意义（P<0.05）;miR-196b、PCDH-17表达与喉鳞癌患者临床病理特征相关性:不同年龄段、性别比例、吸烟史及酗酒史中miR-196b及PCDH-17的表达差异性较小,P>0.05,差异不具有统计学意义。随着组织学分级的增加、T分期及N分期的增加、TNM分期的增加,miR-196表达体现出增加趋势,PCDH-17表达体现出降低趋势,数据差异有显着统计学意义（P<0.05）;miR-196b、PCDH-17 m RNA表达Pearson分析:随着癌组织内miR-196b表达的增加,PCDH-17的表达呈现出下降趋势,相关性系数r值为0.586,P<0.001,差异具有统计学意义;miR-196b、PCDH-17表达与喉鳞癌患者生存率相关性:在79例患者长达5年的随访过程中,发现最后有42例患者依然处于生存状态,其生存率为53.16%。将miR-196的m RNA表达中位数4.922作为截断值,miR-196高表达组患者在不同时间段内患者生存例数要低于miR-196低表达组患者,统计分析数据差异有统计学意义（P<0.05）;PCDH-17的m RNA表达中位数0.228作为截断值,PCDH-17高表达组患者在不同时间段内患者生存例数要高于PCDH-17低表达组患者,统计分析数据差异有统计学意义（P<0.05）。结论:在喉鳞癌病理发展中,miR-196b体现出促癌性特点,PCDH-17体现出抑癌特点,二者表达呈现负相关性,且与喉鳞癌的临床组织学分级及TNM分期等体现相关性,给予下文研究提供基础。第二部分:miR-196b靶向PCDH-17调控人喉鳞状细胞癌进展机制研究目的:充分探讨喉鳞癌病理过程中miR-196b对PCDH-17的靶向调控性以及二者在喉鳞癌细胞生物活性中的调控作用。材料与方法:选取喉鳞癌Hep-2细胞系作为研究对象,原代培养,选取第三代单层细胞作为研究对象,细胞内转染miR-196b inhibitor、miR-NC、miR-196b mimic以及PCDH-17等,使其在喉鳞癌细胞Hep-2中过表达或者部分沉默,分别设置如下分组:Control组（癌细胞不做任何处理）、miR-196b inhibitors（癌细胞内miR-196b inhibitor部分沉默处理）、miR-NC（癌细胞内转染miR-196b空质粒）、PCDH-17（癌细胞内转染PCDH-17,使其在细胞内过表达）、miR-196b mimics+PCDH-17（癌细胞内转染miR-196b及PCDH-17,使其在细胞内过表达）;细胞继续培养48小时后,进行相关项目验证分析:双荧光素酶基因检测miR-196b对PCDH-17的靶向调控作用;RT-PCR检测各组细胞内PCDH-17的m RNA表达,确定miR-196b对PCDH-17的靶向调控性;CCK-8检测各组细胞的增殖趋势;Annexin V法检测各组细胞凋亡性;划痕实验检测各组细胞迁移性;Transwell法检测各组细胞的侵袭性;Western-blotz检测各组细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭等相关蛋白浓度表达分析。结果:miR-196b靶向PCDH-17分析:我们采用Target Scan软件进行数据分析发现,miR-196b的m RNA 3’非编码区预测到一个PCDH-17结合位点,分别构建了miR-196b的荧光素酶野生型（wt-p GL3-miR-196b-3’UTR）和突变型报告基因载体（mut-p GL3-miR-196b-3’UTR）,并通过共转染实验鉴定miR-196b与PCDH-17的结合能力。应用共转染技术将不同组合的野生型和突变型p GL3-miR-196b-UTR表达载体转染到Hep-2细胞中,结果表明共转染野生型表达载体报告基因活性相对于对照组显着降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;在miR-196b的数据分析中,对照组、空白质粒组以及PCDH-17过表达组miR-196b表达差异性较小,差异不具有统计学意义;miR-196b部分沉默组数据明显降低,miR-196b过表达组数据明显提升,差异有统计学意义（P<0.05）;在PCDH-17的数据分析中可以看出,对照组、空白质粒组以及二者共同表达组PCDH-17表达差异性小,分别与对照组数据相比,差异不具有统计学意义;而miR-196b受到抑制以及PCDH-17过表达后,PCDH-17的表达浓度均能明显提升,差异有统计学意义（P<0.05）;CCK-8检测各组细胞增殖活性:随着时间的延长,各组细胞的增殖趋势均明显增加,当miR-196b受到抑制以及PCDH-17过表达后,细胞的增殖趋势增加幅度降低,对照组、空白质粒组以及miR-196a及PCDH-17均过表达组细胞的增殖趋势明显提升,数据差异有显着统计学意义（P<0.05）;Annexin V法检测各组细胞凋亡性:当miR-196b受到抑制以及PCDH-17过表达后,细胞的凋亡趋势明显加强,细胞凋亡率分别为（13.20±1.17）%及（13.37±1.51）%,数据差异有统计学意义（P<0.05）;对照组、空白质粒组以及miR-196a及PCDH-17均过表达组细胞的凋亡趋势差异性较小,分别为（5.61±0.75）%、（5.49±1.01）%及（5.37±1.51）%,各组数据同对照组相比,差异不具有统计学意义;划痕实验及Transwell实验:随着时间的延长,各组细胞均体现出一定的迁移、侵袭能力,当miR-196b受到抑制以及PCDH-17过表达后,细胞的迁移、侵袭能力明显降低,P>0.05,差异不具有统计学意义;而对照组、空白质粒组以及miR-196a及PCDH-17均过表达组细胞的迁移侵、袭能力明显提升,数据差异有统计学意义（P<0.05）;Western-blot检测:miR-196b受到抑制以及PCDH-17过表达后,Survivin、Bcl-2、MMP-2及MMP-9蛋白表达浓度降低,Bax蛋白表达浓度提升,细胞的增殖、迁移、侵袭趋势明显降低,凋亡能力明显提升,数据差异有统计学意义（P<0.05）;对照组、空白质粒组以及miR-196a及PCDH-17均过表达组细胞的Survivin、Bcl-2、MMP-2及MMP-9蛋白表达浓度提升,Bax蛋白表达浓度下降,增殖活性、迁移、侵袭能力明显提升,细胞的凋亡性降低,P>0.05,差异不具有统计学意义。结论:在喉鳞癌病理发展中,miR-196b负向靶向PCDH-17进而对喉鳞癌细胞的生理行为进行调控,miR-196b过表达可以明显抑制PCDH-17的表达,促进喉鳞癌细胞的增殖活性、迁移及侵袭能力,细胞凋亡性降低;miR-196b被抑制后后体现出相反的趋势,给予临床一定的启发。
郝延茹[4]（2020）在《TROP2在头颈肿瘤中的作用及其调控机制研究》文中指出目的:头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）是全球最常见的恶性肿瘤之一,虽然近年来针对头颈部鳞癌的治疗手段有了明显提高,但是其复发率和病死率仍居高不下。因此深入研究挖掘头颈鳞癌发病机制并试图寻找能精确预测其预后的分子靶标,对实现头颈鳞癌各体化治疗意义重大。TROP2（人滋养层细胞表面抗原2）目前被广泛证实在多种上皮源性癌症中（包括喉癌、鼻咽癌）高表达,且与肿瘤的进展及不良预后密切相关。然而TROP2在头颈肿瘤中高表达的原因、其上游调控因素及TROP2的下游传导通路目前仍不十分清晰。环状RNA（circRNA）和微小RNA（miRNA）作为调节因子在肿瘤的发生、转移中起关键作用,是当前肿瘤研究领域中的重点。因此,本研究在探讨TROP2在头颈鳞癌组织中表达水平及其与病人预后相关性的基础上,进一步在体外、体内实验中,通过沉默TROP2,明确其对肿瘤细胞增殖、侵袭及转移的作用机制。并重点分析circRNA和miRNA对TROP2的靶向调控作用及下调信号转导通路。方法:本研究首先在收集的42例喉癌及下咽癌患者样品中,采用免疫组化方法检测TROP2蛋白的表达水平并与癌旁组织做比对;通过Kaplan-Meier生存曲线,Log-rank检验,单因素、多因素Cox回归分析模型,结合临床病理资料,分析TROP2表达对患者的复发、总体生存时间和无病生存时间的影响。其二,通过qRT-PCR筛选两种TROP2高表达头颈鳞癌细胞株;采用脂质体转染siRNA法,构建沉默TROP2细胞株（Fadu及SCC-9）;并通过qRT-PCR法及Western Blot法对沉默TROP2在mRNA及蛋白水平加以验证。采用MTS法,Transwell小室及基质胶侵袭小室检测沉默TROP2后对头颈鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的体外作用机制;通过构建沉默TROP2的荷瘤小鼠动物模型,观察肿瘤生长情况并采用免疫组化法检测移植瘤中Ki-67的表达水平,研究沉默TROP2对体内肿瘤形成的抑制作用。其三,应用5种生物信息靶基因预测软件寻找靶向调控TROP2的潜在miRNAs,通过KEGG及GO途径分析生物学效应,筛选miRNAs;利用qRT-PCR方法检测它们在头颈鳞癌细胞株的表达水平;采用qRT-PCR及Western blot法检测在转染miRNAs模拟物,上调miRNAs后对TROP2表达水平的影响;应用载体克隆技术,构建TROP2 3’UTR结合位点和突变结合位点重组质粒,通过双荧光素酶基因报告实验验证miRNA（miR-488-3p）与TROP2的直接靶向作用;采用Western blot法检测沉默TROP2后其下游传导通路（ERK/MAPK通路及PI3K/AKT通路）密切相关的蛋白分子ERK1/2,AP-1和AKT水平,明确TROP2参与调节头颈鳞癌发生、发展传导通路的关系。最后,通过circRNA数据库和miRNA靶基因数据库筛选可特异性结合miR-488-3p的circRNA（circ-0000495）;采用qRT-PCR检测circ-0000495在头颈鳞癌细胞株中的表达水平及应用RNA酶处理前后的线性和环状circ-0000495的表达水平,验证circ-0000495的稳定性;采用qRT-PCR法检测转染了miR-488-3p模拟物的Fadu细胞中的circ-0000495、miR-488-3p及TROP2表达水平,探讨三者之间的调控作用;最后通过双荧光素酶基因报告实验验证circ-0000495对miR-488-3p的直接靶向作用。结果:TROP2与头颈鳞癌的复发预后密切相关。实验结果显示TROP2在头颈鳞癌组织中呈高表达,且在复发组的表达水平明显高于非复发组的表达水平（p<0.05）;Kaplan-Meier生存曲线显示TROP2高表达组患者的总生存期（p=0.027）和无病生存期（p=0.015）明显较TROP2低表达组差,表明TROP2高表达与头颈鳞癌的复发、总生存期及无病生存期密切相关;在对患者的其他临床病理参数的单因素,多因素Cox回归分析中,仅TROP2表达水平与总生存期和无病生存期密切相关,说明TROP2是头颈鳞癌患者预后的一个独立影响因素（p值分别为0.031和0.018）。沉默TROP2对体外头颈肿瘤细胞的生长抑制及体内抑瘤作用。头颈鳞癌细胞株Fadu及SCC-9因异常高表达TROP2而被选择用于体外沉默TROP2实验。通过siRNA干扰技术,将特异性抗TROP2的siRNA通过脂质体介导的转染方法成功构建沉默TROP2细胞株。结果发现在转染后48小时,两个细胞系的TROP2mRNA表达均显着减少,分别减少了38%及22%（p<0.05）,TROP2蛋白的表达水平也显着下降。此外,沉默TROP2后,Fadu及SCC-9细胞增殖活力显着下降,尤其是在48小时后增殖活力下降最明显（p<0.05）;沉默TROP2后,Fadu及SCC-9细胞的迁移能力及侵袭能力明显下降,分别为对照组的75%和55%（迁移能力,p<0.01）,及60%和48%（侵袭能力,p<0.05）。荷瘤动物研究显示,沉默TROP2后小鼠移植瘤体积明显比对照组小,且随着时间的延长差异显着（p<0.05）。此外,小鼠移植瘤中肿瘤细胞增殖标志物Ki-67的表达在沉默TROP2后明显比对照组降低（p<0.01）,说明沉默TROP2后可抑制肿瘤生长。miR-488-3p是TROP2的特异上游调控miRNA。TROP2通过调节PI3K/AKT与ERK/MAPK信号传导通路调节头颈鳞癌发生发展。三个miRNAs:miR-15a-3p、miR-488-3p及miR-550b-2-5p被预测出对TROP2具有潜在靶向作用;经在Fadu和SCC-9细胞检测三者基础表达水平后发现miR-488-3p和miR-15a-3p表达一致下调。进一步通过转染miR-488-3p及miR-15a-3p的模拟物筛选发现,转染miR-488-3p模拟物的细胞中TROP2 mRNA及蛋白的表达量明显减少,说明miR-488-3p对TROP2具有调节作用。最后双荧光素酶基因报告实验证实miR-488-3p能够与TROP2 3’UTR上的位点特异性结合,是TROP2的特异靶向miRNA。此外,沉默TROP2后信号通路蛋白分子AKT、p44/42（ERK1/2）及AP-1的磷酸化水平降低,而AKT和ERK1/2的水平没有改变,证明TROP2通过调节PI3K/AKT与ERK/MAPK信号传导通路调节头颈鳞癌发生发展。Circ-0000495通过海绵吸附miR-488-3p,上调TROP2表达。通过circRNA数据库及miRNA靶基因数据库预测出circ-0000495对miR-488-3p具有潜在靶向作用;circ-0000495在三种头颈鳞癌细胞株（Fadu、SCC22和SCC-9）中显着高表达;经RNase R处理后,PCR结果显示线性circ-0000495 mRNA表达在两种头颈肿瘤细胞（Fadu和SCC-9）中明显降低,而环状的circ-0000495表达无明显变化;当在Fadu细胞中转染miR-488-3p模拟物后,结果发现miR-488-3p大幅增高,TROP2表达明显下降（p<0.05）,而circ-0000495表达量无明显变化;双荧光素酶基因报告实验证实circ-0000495与miR-488-3p之间存在特异靶向调节作用。结论:本研究揭示TROP2高表达与头颈鳞癌的复发、总生存期及无病生存期变短密切相关,是头颈鳞癌患者预后的一个独立影响因素。体外、体内实验表明TROP2可显着调节头颈鳞癌细胞的增殖、侵袭及转移能力并影响体内肿瘤的形成。值得注意的是,本研究首次在头颈鳞癌细胞中发现circ-0000495异常高表达,并通过特异靶点海绵样吸附miR-488-3p,造成miR-488-3p表达下调;由于miR-488-3p具有TROP2特异靶点,因此下调的miR-488-3p解除了对TROP2的抑制作用,从而造成细胞内TROP2基因的上调表达。上调的TROP2进而通过PI3K/AKT与MAPK信号传导通路调节头颈鳞癌发生、发展和转移。对circ-0000495-miR-488-3p-TROP2调节通路的理解,势必为头颈鳞癌的治疗打开新的思路。
刘雪梅,王翡[5]（2018）在《细胞凋亡抑制基因和促凋亡基因在喉鳞癌组织中的表达与临床意义》文中指出目的研究细胞凋亡抑制基因（bcl-2）、促凋亡基因（Bax）在喉鳞癌中的表达情况及其临床意义。方法收集2017年1月至7月在本院确诊的54例喉鳞癌患者的癌组织和对应的癌旁组织,用免疫印迹法测定这2种组织中Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达情况;用免疫组化（SP）法测定Bcl-2蛋白、Bax蛋白与血管内皮生长因子-C（VEGF-C）蛋白水平及其阳性表达情况,探讨Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达与喉鳞癌患者临床病理特征之间的关系,分析Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达与VEGF-C表达的关系,探讨Bcl-2蛋白、Bax蛋白阳性表达病例在这2种组织中微血管密度（MVD）间的差异。结果免疫印迹法测得:喉鳞癌患者癌组织中的Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达明显高于对应癌旁正常组织（P<0.05）。SP测得:Bcl-2蛋白、Bax蛋白、VEGF-C蛋白在喉鳞癌患者癌组织中的表达阳性率分别为53.7%,50%,42.6%,明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义（均P<0.05）。喉鳞癌患者癌组织中Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达阳性率跟喉鳞癌临床分期、喉鳞癌复发或转移、淋巴结转移均相关（均P<0.05）。经Pearson相关性分析,喉鳞癌患者癌组织中Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达均与VEGF-C表达呈正相关（r=0.762,0.703;均P<0.05）。在癌组织中,Bcl-2蛋白、Bax蛋白阳性表达病例MVD值分别为56.21±1.76,52.05±1.31;均明显高于癌旁正常组织中MVD值（30.83±1.45,29.93±1.27）,差异均有统计学意义（均P<0.05）。在癌组织中,Bcl-2蛋白、Bax蛋白阴性表达病例MVD值分别为31.03±2.14,30.16±1.95,与癌旁正常组织中的MVD值比较差异无统计学意义（均P>0.05）。结论喉鳞癌组织中Bcl-2蛋白和Bax蛋白存在异常表达,其可能会促进VEGF-C表达,以诱发微血管在喉鳞癌癌组织中的新生。
冯燚源[6]（2018）在《USP9X、BCL-2在喉鳞癌组织中的表达及其相关性分析》文中研究说明目的:1.应用免疫组织化学方法研究USP9X、BCL-2在喉鳞癌病变组织中的表达及其与临床病理特征的关系,为喉鳞癌诊治与预后判断提供依据;2.探讨USP9X、BCL-2在喉鳞癌病变组织中表达的相关性,为研究喉鳞癌发病机理提供理论依据。方法:1.采集川北医学院附属医院耳鼻咽喉头颈外科2012年到2014年间喉鳞癌初治手术患者临床病理资料55份;2.收集相应患者喉癌组织石蜡标本55例及喉癌切缘组织石蜡标本25例;3.采用免疫组化Super Vision二步法检测USP9X、BCL-2在喉鳞癌组织及切缘组织中的表达。4.统计学方法采用SPSS22.0对实验数据进行分析,P<0.05为具有统计学意义。结果:1.免疫组织化学揭示USP9X、BCL-2在喉鳞癌组织中高表达,切缘正常组织无表达或低表达。2.USP9X、BCL-2均与喉鳞癌临床分期、病理分化程度、颈部淋巴结转移密切相关（P<0.05）。3.USP9X与BCL-2在喉鳞癌表达呈正相关。结论:1.USP9X、BCL-2在喉鳞癌中均高表达,可能参与了喉鳞癌的发生、发展,提示USP9X、BCL-2可作为喉鳞癌的早期诊断及防治评估指标。2.USP9X、BCL-2在喉鳞癌患者中表达水平与临床分期、颈部淋巴结转移呈正相关,与病理分化程度呈负相关,提示检测USP9X、BCL-2表达水平可协助评估喉鳞癌患者的预后。3.USP9X、BCL-2在喉鳞癌中表达呈高度正相关性,提示可能存在USP9X通过BCL-2促进细胞生存机制,促进肿瘤发生发展。
朱雪洁[7]（2018）在《RAGE对宫颈鳞癌生物学行为的影响及其相关机制》文中研究表明目的:在本课题组的前期研究中,发现晚期糖基化终末产物受体（The receptor for advanced-glycation end products,RAGE）在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变、宫颈鳞癌中的表达逐渐增高。但RAGE的表达对宫颈鳞癌细胞生物学行为的影响尚未明确。本研究通过调节宫颈鳞癌细胞中RAGE的表达,观察其对宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移等生物学行为及裸鼠成瘤能力的影响及相关机制,以探讨RAGE在宫颈鳞癌发生发展中的作用。方法:第一部分:分别采用p Lenti-C-m GFP-RAGE质粒转染方法和RNA干扰技术构建稳定过表达和低表达RAGE基因的宫颈鳞癌Si Ha细胞和Ca Ski细胞,然后采用Western blot方法检测细胞中RAGE蛋白表达情况;分别采用CCK-8方法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力。第二部分:采用Western blot方法检测RAGE表达改变后Si Ha细胞中增殖相关蛋白PCNA、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及侵袭和迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9、Fascin、Ezrin蛋白的表达。第三部分:构建裸鼠宫颈癌皮下移植瘤模型,分别将转染RAGE慢病毒的宫颈鳞癌细胞、转染空载体的宫颈鳞癌细胞接种裸鼠,比较两组肿瘤体积的变化和瘤体重量。并采用Western blot方法检测增殖相关蛋白PCNA、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及侵袭和迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9、Fascin、Ezrin蛋白的表达情况。结果:首先,转染RAGE慢病毒后Si Ha细胞中RAGE蛋白的表达为1.96±0.34,明显高于未转染组（1.18±0.15）和空载体组（1.16±0.18）,差异有统计学意义（P<0.05）;同样,转染RAGE慢病毒后Ca Ski细胞内RAGE蛋白表达量明显高于未转染组和空载体组。提示稳定高表达RAGE的Si Ha和Ca Ski细胞构建成功。而RAGE RNA干扰后Si Ha细胞中RAGE的表达明显下降,干扰组1和干扰组2中RAGE的表达量分别为0.17±0.08、0.23±0.11,均明显低于阴性对照组的1.04±0.11,差异有统计学意义（P<0.05）;同样,Ca Ski细胞RAGE RNA干扰组1和干扰组2中RAGE的表达也均明显低于阴性对照组。第一部分1.与未转染组0.99±0.03和空载体组0.98±0.08比较,转染RAGE慢病毒组Si Ha细胞450nm处的吸光度值明显增高（1.14±0.21）,P<0.05;与阴性对照组（1.02±0.21）相比,RAGE RNA干扰实验组450nm处的吸光度值（干扰组1:0.82±0.23;干扰组2:0.87±0.19）明显减小,P<0.05。在Ca Ski细胞中同样发现RAGE高表达促进细胞增殖,而低表达抑制细胞增殖。2.Si Ha细胞未转染组、空载体组与RAGE过表达组的凋亡率分别为18.33±2.06%、19.81±2.49%和7.10±2.67%,RAGE过表达组的凋亡率明显低于未转染组和空载体组,P<0.05。RNA干扰组1和干扰组2中,Si Ha细胞的凋亡率分别为12.84±0.44%、10.32±0.35%,均明显高于阴性对照组4.34±0.18%,P<0.05。在Ca Ski细胞中同样发现RAGE高表达抑制细胞凋亡,而低表达促进细胞凋亡。3.在Transwell细胞侵袭实验中,与未转染组（356.81±21.30）和空载体组（349.60±42.79）相比,RAGE过表达组Si Ha细胞的穿透数目（603.61±181.73）显着增加,P<0.05。RAGE RNA干扰后Si Ha细胞的细胞穿透数目（干扰组1:216.58±32.16;干扰组2:267.23±52.48）与阴性对照组（446.41±45.23）相比均明显减少,P<0.05。在Ca Ski细胞中同样发现RAGE表达上调后,细胞侵袭能力增加,而RAGE表达下调会抑制细胞侵袭。4.在Transwell细胞迁移实验中,Si Ha细胞RAGE过表达组细胞穿透数目为669.33±41.27,与未转染组的423.0±37.45和空载体组的433.02±57.23相比,均明显增多,P<0.05。RAGE RNA干扰后Si Ha细胞的细胞穿透数目（干扰组1:211.12±16.43;干扰组2:217.52±14.51）与阴性对照组（320.13±12.82）相比均明显减少,P<0.05。在Ca Ski细胞中同样发现RAGE表达上调后,细胞迁移能力增加,而RAGE表达下调会抑制细胞迁移。第二部分1.与未转染组和空载体组相比,RAGE过表达组Si Ha细胞中增殖相关蛋白PCNA、凋亡相关蛋白Bcl-2、及侵袭和迁移相关蛋白Ezrin表达均明显增加（P<0.05）。2.与阴性对照组相比,RAGE RNA干扰后细胞中PCNA、Bcl-2、Ezrin表达均明显减少（P<0.05）。3.而三组细胞中,细胞中凋亡相关蛋白Bax、侵袭和迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9、Fascin表达变化无统计学意义（P>0.05）。第三部分1.RAGE过表达组裸鼠的肿瘤体积和瘤体重量分别为1599.47±247.97mm3和1.67±0.35g,均明显大于空载体组的629.92±140.59mm3和0.74±0.42g（P<0.05）。2.与空载体组相比,RAGE过表达组肿瘤组织中PCNA、Fascin蛋白的表达量明显升高,P<0.05,Bax蛋白的表达量明显减少,P<0.05。而MMP-2、MMP-9、Ezrin蛋白表达量在两组之间没有差别。结论:1.RAGE可以促进宫颈鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,抑制细胞的凋亡。2.RAGE对宫颈癌细胞生物学行为的影响与增殖相关蛋白PCNA、凋亡相关蛋白Bcl-2和侵袭迁移相关蛋白Ezrin相关。3.RAGE基因具有促进宫颈鳞癌细胞成瘤的能力。该作用和PCNA、Bax、Fascin蛋白相关,而与MMP-2、MMP-9、Ezrin蛋白无关。
袁恩健[8]（2014）在《Bcl-2,E-cadherin,N-cadherin蛋白在喉鳞癌中的表达及临床意义》文中提出目的：通过检测Bcl-2,E-cadherin,N-cadherin蛋白在喉鳞癌中的表达水平，探讨Bcl-2,E-cadherin,N-cadherin蛋白三者与喉鳞癌发生发展、临床病理特征的关系,为进一步阐明喉鳞癌的发病机制，诊断指标、评估预后提供理论和实验依据。材料与方法：47例人喉鳞癌标本由湖南省肿瘤医院病理科提供，26例声带息肉标本来自南华大学病理教研室，40例正常喉粘膜标本来源南华大学司法鉴定中心。石蜡标本每个切5张白片，分别进行HE染色、免疫组化、阴性对照。采用SP法检测喉鳞癌及非喉癌组织（非典型增生、声带息肉及正常喉粘膜）中Bcl-2,E-cadherin,N-cadherin蛋白的表达，以PBS代替一抗作为阴性对照。结果：1、Bcl-2蛋白阳性表达率在喉鳞癌、非典型增生、声带息肉以及正常喉粘膜中分别为61.7%（29/47）、33.3%（11/33）、19.2%（5/26）、0（0/40）。Bcl-2蛋白在喉鳞癌中的表达率远高于在癌旁、息肉及正常喉粘膜的组织。喉鳞癌中Bcl-2蛋白与喉鳞癌的病理组织学分级、临床分期、淋巴结转移、浸润深度等相关（P＜0.05），与年龄、性别无关（P>0.05）。2、喉鳞癌、非典型增生、声带息肉及正常喉粘膜中E-cadherin蛋白阳性表达率分别为40.4%（19/47）、66.7%（22/33）、84.7%（22/26）、100%（40/40）。E-cadherin蛋白在喉鳞癌中的表达率远低于在癌旁、息肉及正常的喉粘膜组织。E-cadherin蛋白的阳性表达和喉鳞癌的病理组织学分级、临床分期、淋巴结转移、浸润深度等密切相关（P＜0.05），与年龄、性别无关（P>0.05）。3、喉鳞癌、非典型增生、声带息肉及正常喉粘膜中N-cadherin蛋白阳性表达率分别为70.2%（33/47）、42.4%（14/33）、11.5%（3/26）、0（0/40）。N-cadherin蛋白的阳性表达与喉鳞癌的病理学组织分级、临床分期、淋巴结转移、浸润深度等相关（P＜0.05），与年龄、性别无关（P>0.05）。4、喉鳞癌中，Bcl-2与E-cadherin蛋白的表达呈负相关（r=-0.421,P=0.003），与N-cadherin蛋白的表达呈正相关（r=0.635, P=0.000）， E-cadherin蛋白与N-cadherin蛋白的表达呈负相关（r=-0.411, P=0.004）。5、生存分析:对有生存资料的47例喉鳞癌患者进行生存分析，我们发现Bcl-2蛋白强阳性表达者生存期明显低于阴性表达者，E-cadherin阴性表达者、N-cadherin蛋白阳性表达者其生存期明显缩短。结论：1、喉鳞癌中Bcl-2，N-cadherin蛋白表达上调，E-cadherin蛋白表达下调。2、Bcl-2，E-cadherin和N-cadherin蛋白的表达与喉鳞癌的临床分期、病理学组织分级、淋巴结癌转移及生存期密切相关。3、联合检测Bcl-2，E-cadherin，N-cadherin蛋白在喉鳞癌中表达，对预测喉鳞癌的侵袭转移、判断预后具有重要意义。
齐志勇,贾永峰,张治平,朱林琳[9]（2014）在《S100A4、Bcl-2、Survivin在喉癌组织中的表达及临床意义》文中研究说明目的探讨喉鳞状细胞癌（喉鳞癌）S100A4、Bcl-2、Survivin的表达水平在喉鳞癌中的临床病理意义及相互关系。方法收集手术切除喉鳞癌组织标本40例（其中高分化15例、中分化5例、低分化20例,伴有淋巴结转移18例）,均为首次手术,术前均未接受放疗、化疗及肿瘤药物治疗;另取20例声带息肉组织作对照组。所有切除手术标本置于4%甲醛液中固定后常规石蜡包埋,通过免疫组化法检测S100A4、Bcl-2、Survivin的表达并进行分析。结果声带息肉组S100A4、Bcl-2、Survivin阳性表达率分别为15%,20%和10%,高中分化组分别为75%,60%和55%,低分化组分别为95%,95%和90%,3组比较均有显着性差异（P均<0.05）。有淋巴结转移者S100A4、Survivin阳性表达率显着高于无淋巴结转移者（P均<0.05）,Bcl-2阳性表达率与无淋巴结转移者比较无显着性差异（P>0.05）。恶性肿瘤S100A4阳性表达组与阴性表达组中Survivin阳性表达率比较具有显着性差异（P<0.01）,等级分析表明S100A4与Survivin表达存在正相关性关系（r=0.525,P<0.01）。恶性肿瘤组织S100A4阳性组与阴性组中Bcl-2的阳性表达率比较无显着性差异（P>0.05）,等级分析表明S100A4与Bcl-2表达无相关性（r=0.109,P>0.05）。Survivin阳性表达组与阴性表达组中Bcl-2阳性表达率比较有显着性差异（2=6.580,P<0.01）,等级分析表明Survivin与Bcl-2表达有显着正相关性（r=0.473,P<0.01）。结论 S100A4、Bcl-2、Survivin均是反映喉鳞癌进展、转移等生物学特性及预后的重要标记物,三种基因在喉癌的发生发展中有重要作用。通过对它们的联合检测可以对喉癌的早期诊断、治疗和判断预后提供理论依据。
康园园[10]（2008）在《Galectin-3和VEGF在喉鳞癌中的表达以及十字孢碱诱导人喉癌细胞HEP-2细胞凋亡》文中认为鳞状细胞癌是头颈部最常见的恶性肿瘤,而喉鳞癌占人类癌症的3%,在头颈部恶性肿瘤中位居第二,且有上升趋势。因此,对该病的发生、转移和复发机制的研究具有重要意义。Galectin-3是动物凝集素家族中的一个多功能蛋白,近来的研究显示它广泛表达在人类正常和肿瘤细胞,并调控肿瘤细胞粘附、增殖、分化和血管生成。血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF）是特异地作用于内皮细胞的有丝分裂原,是肿瘤在原发和继发部位生长和新血管的形成的必要条件,并为肿瘤经血行播散提供了途径。本研究采用免疫组化和免疫印记技术观察并检测了Galectin-3和VEGF在喉鳞状细胞癌和喉良性病变组织中表达的相关性,对Galectin-3和VEGF在喉鳞癌组织中的表达与肿瘤分化、生长及转移中的相关意义进行了初步探讨。这为进一步阐明Galectin-3在肿瘤细胞的增殖和凋亡、迁移、播散以及肿瘤血管新生作用中的调控机制提供了理论依据。本论文用不同浓度的十字孢碱对人喉癌细胞HEP-2刺激不同时间,借助形态学观察以及蛋白表达水平的检测,选取合理的诱导浓度及诱导时间,建立一种稳定的细胞凋亡模型。同时,将白藜芦醇和十字孢碱共同刺激细胞,发现白藜芦醇对十字孢碱诱导的细胞凋亡有明显的协同作用,为研究细胞凋亡的信号转导机制提供了实验基础和理论依据。
二、bcl-2基因家族在喉鳞癌组织中的表达及意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、bcl-2基因家族在喉鳞癌组织中的表达及意义（论文提纲范文）
（1）过表达HOXC11通过调控PPAE-γ和NF-κB通路促进头颈部鳞癌增殖和侵袭的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 头颈部恶性肿瘤的临床治疗进展 |
| 1.1.1 头颈部恶性肿瘤的流行病学及病理学情况 |
| 1.1.2 头颈恶性肿瘤的诊断学上的研究进展 |
| 1.1.3 头颈部恶性肿瘤的临床治疗进展 |
| 1.1.4 头颈部恶性肿瘤发生的分子机制假说 |
| 1.2 HOXC基因家族在恶性肿瘤中的研究情况 |
| 1.2.1 HOX基因家族的结构及一般生物学功能 |
| 1.2.2 HOXC基因家族在恶性肿瘤中的研究进展 |
| 1.2.3 HOXC基因家族在头颈部恶性肿瘤中的研究进展 |
| 1.3 NF-κB信号通路在头颈部恶性肿瘤中的研究情况 |
| 1.3.1 NF-κB信号通路的组成和一般生物学功能 |
| 1.3.2 NF-κB信号通路在头颈部恶性肿瘤中的研究进展 |
| 1.4 PPAR-γ信号通路在头颈部恶性肿瘤中的研究情况 |
| 1.4.1 PPAR-γ信号通路的组成和一般生物学功能 |
| 1.4.2 PPAR-γ信号通路在头颈部恶性肿瘤中的研究进展 |
| 第二章 HOXC11在头颈部鳞癌的表达及其临床意义 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 HOXs家族成员在头颈部鳞癌中的mRNA表达 |
| 2.2.2 HOXC11的高表达与头颈部鳞癌患者差的生存预后相关 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 HOXC11对头颈鳞癌肿瘤细胞的特性的调控 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 稳定沉默HOXC11的头颈部鳞癌细胞模型构建 |
| 3.2.2 沉默HOXC11对头颈部鳞癌体外生物学特性的影响 |
| 3.2.3 沉默HOXC11对头颈部鳞癌体内生物学特性的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 头颈部鳞癌中HOXC11作用通路机制的初步探索 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 总结和展望 |
| 参考文献 |
| 附录1 中英文缩写对照 |
| 附录2 鼻咽拭子检测Septin9基因甲基化对鼻咽癌早期诊断的意义 |
| 1 研究背景与目的 |
| 2 研究的中文摘要 |
| 3 研究的英文摘要 |
| 4 正文 |
| 参考文献 |
| 攻读博士期间主要成果 |
| 致谢 |
（2）转录因子FOXN3在急性髓系白血病中的作用及其致病机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分:FOXN3在成人急性髓系白血病中表达减低及其临床意义 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 FOXN3在AML患者中表达减低 |
| 3.2 FOXN3低表达与高龄和高白细胞具有相关性 |
| 3.3 FOXN3表达水平与分子学异常的相关性 |
| 3.4 FOXN3的表达与治疗反应的相关性 |
| 3.5 FOXN3低表达的预后意义 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分:FOXN3在急性髓系白血病细胞系中的生物学功能的研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 FOXN3的表达在AML细胞系中较对照组降低 |
| 3.2 FOXN3的表达在过表达/敲减后明显上调/下调 |
| 3.3 FOXN3对AML细胞系细胞增殖的影响 |
| 3.4 FOXN3对AML细胞系细胞凋亡的影响 |
| 3.5 FOXN3对AML细胞系细胞周期的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第三部分:FOXN3在AML中通过靶向转录调控E2F5下调MAPK通路发挥肿瘤抑制作用 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 ChIP-Seq初筛转录因子FOXN3的靶基因 |
| 3.2 对候选靶基因进行筛选验证 |
| 3.3 确定E2F5是FOXN3直接转录抑制的靶基因 |
| 3.4 E2F5 是新型的AML癌基因 |
| 3.5 FOXN3通过靶向下调E2F5发挥肿瘤抑制作用 |
| 3.6 FOXN3-E2F5-EZH2-MAPK信号通路的确立 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 FOXN3转录因子的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）MiR-196b靶向PCDH-17调控人喉鳞状细胞癌进展的机制研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 1.1 喉鳞状细胞癌的发病率及病因 |
| 1.2 miRNAs与喉鳞状细胞癌关联性分析 |
| 1.3 miR-196b介绍 |
| 1.4 PCDH-17介绍 |
| 1.5 课题研究的前景与意义 |
| 第一部分 :miR-196b、PCDH-17 表达在人喉鳞状细胞癌中的差异性表达及与患者预后关联性分析 |
| 1.引言 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 实验试剂及仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 一般临床资料分析 |
| 3.2 RT-PCR检测喉鳞癌及癌旁组织中miR-196b及 PCDH-17的mRNA表达 |
| 3.3 免疫组织化学染色检测喉鳞癌及癌旁组织中PCDH-17蛋白阳性率表达 |
| 3.4 miR-196b、PCDH-17 表达与喉鳞癌患者临床病理特征相关性 |
| 3.5 miR-196b、PCDH-17 mRNA表达Pearson分析 |
| 3.6 miR-196b、PCDH-17 表达与喉鳞癌患者生存率相关性 |
| 4.讨论 |
| 5.研究结论 |
| 第二部分 :miR-196b靶向PCDH-17 调控人喉鳞状细胞癌进展的机制研究 |
| 1.引言 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 实验试剂及设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 .miR-196b靶向PCDH-17 分析 |
| 3.2 .RT-PCR检测各组细胞内miR-196b及 PCDH-17的mRNA表达 |
| 3.3 .Western-blot检测各组细胞内PCDH-17 的蛋白浓度表达 |
| 3.4 .CCK-8检测各组细胞增殖活性 |
| 3.5 Annexin V法检测各组细胞凋亡性 |
| 3.6 划痕实验 |
| 3.7 Transwell实验 |
| 3.8 Western-blot检测 |
| 4.讨论 |
| 5.研究结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 miRNAs在喉鳞状细胞癌治疗中的研究进展 |
| 参考文献 |
（4）TROP2在头颈肿瘤中的作用及其调控机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 引言 |
| 第一章 TROP2在头颈肿瘤组织中的表达及其与疾病预后相关性的研究 |
| 前言 |
| 1 组织标本及病例资料 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 主要试剂 |
| 2.2 主要仪器 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 免疫组化法检测TROP2 蛋白在头颈鳞癌组织中的表达水平 |
| 3.2 统计分析TROP2 蛋白表达水平与头颈鳞癌患者预后的相关性 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 TROP2 蛋白在头颈鳞癌组织中表达水平的检测结果 |
| 4.2 TROP2 的表达水平与头颈鳞癌患者预后的相关性分析 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 第二章 沉默TROP2对体外头颈肿瘤细胞的抑瘤效应及体内抑瘤作用的研究 |
| 前言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 细胞株、实验动物 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 沉默TROP2 对体外头颈肿瘤细胞的抑瘤效应的研究 |
| 2.1.1 头颈鳞癌细胞株中TROP2 m RNA表达水平的检测 |
| 2.1.2 沉默TROP2 的头颈鳞癌细胞株的建立 |
| 2.1.3 沉默TROP2 细胞株的TROP2 m RNA表达水平的检测 |
| 2.1.4 沉默TROP2 细胞株的TROP2 蛋白表达水平的检测 |
| 2.1.5 沉默TROP2 对体外肿瘤细胞的生长抑制作用的研究 |
| 2.1.6 沉默TROP2 对体外肿瘤细胞的迁移能力及侵袭能力的影响 |
| 2.2 沉默TROP2 对体内肿瘤形成的抑瘤作用研究 |
| 2.2.1 荷瘤动物模型的建立和分组 |
| 2.2.2 肿瘤大小测定及生长趋势分析 |
| 2.2.3 沉默TROP2 对小鼠肿瘤组织中Ki-67 表达的影响 |
| 3 结果 |
| 3.1 沉默TROP2 体外头颈肿瘤细胞的抑瘤效应的研究 |
| 3.1.1 头颈鳞癌细胞株中TROP2 mRNA表达水平的检测结果.. |
| 3.1.2 沉默TROP2 的头颈鳞癌细胞株的建立 |
| 3.1.3 沉默TROP2 细胞株的TROP2 m RNA表达水平检测结果 |
| 3.1.4 沉默TROP2 细胞株的TROP2 蛋白表达水平检测结果 |
| 3.1.5 沉默TROP2 对体外肿瘤细胞的生长抑制作用结果 |
| 3.1.6 沉默TROP2 对体外肿瘤细胞的运动能力及转移能力的抑制效果 |
| 3.2 沉默TROP2 对体内肿瘤的抑瘤作用研究 |
| 3.2.1 荷瘤动物的生长及剖检情况 |
| 3.2.2 肿瘤大小测定及生长趋势分析 |
| 3.2.3 沉默TROP2 对小鼠肿瘤组织中Ki-67 表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三章 MiRNA对 TROP2 的调控机制以及TROP2 的肿瘤传导通路的研究 |
| 前言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 细胞株、菌株和载体质粒 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 MiRNA对 TROP2 的调控机制研究 |
| 2.1.1 潜在靶向TROP2的miRNAs的筛选 |
| 2.1.2 候选miRNAs在头颈鳞癌细胞株中表达水平的检测 |
| 2.1.3 MiR-488-3p对 TROP2 的调控作用研究 |
| 2.2 TROP2 的肿瘤传导通路研究 |
| 2.2.1 细胞培养 |
| 2.2.2 细胞转染 |
| 2.2.3 Western blot检测 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 MiRNA对 TROP2 的调控机制研究 |
| 3.1.1 潜在靶向TROP2的miRNAs筛选结果 |
| 3.1.2 候选mi RNAs在头颈鳞癌细胞株中表达水平的检测结果 |
| 3.1.3 MiR-488-3p对 TROP2 的调控作用研究 |
| 3.2 TROP2 的肿瘤传导通路研究结果 |
| 3.2.1 TROP2 下游信号通路蛋白表达水平的检测结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四章 CircR-0000495-mi R-488-3p-TROP2 在头颈肿瘤中调控机制的研究 |
| 前言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 靶向miR-488-3p的 circRNAs的筛选 |
| 2.2 Circ-0000495 在头颈鳞癌细胞株中的表达水平检测 |
| 2.3 上调miR-488-3p对 circ-0000495及TROP2 m RNA表达水平的影响 |
| 2.3.1 细胞培养及复苏 |
| 2.3.2 细胞转染 |
| 2.3.3 qRT-PCR |
| 2.4 Circ-0000495 对mi R-488-3p的直接靶向作用研究 |
| 3 结果 |
| 3.1 Circ-0000495 在头颈鳞癌细胞株中的表达水平 |
| 3.2 Circ-0000495 在头颈鳞癌细胞株中的稳定性 |
| 3.3 上调miR-488-3p对circ-0000495 及TROP2 m RNA表达水平的影响结果 |
| 3.4 Circ-0000495 对miR-488-3p的直接靶向作用研究结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 1 TROP2 |
| 1.1 TROP2 的结构与功能 |
| 1.2 TROP2 的分布与作用 |
| 1.3 TROP2 与肿瘤 |
| 1.3.1 TROP2 在肿瘤中的表达 |
| 1.3.2 TROP2 在肿瘤中的作用机制 |
| 2 MicroRNA |
| 2.1 MicroRNA与肿瘤 |
| 2.2 MicroRNA在肿瘤中的作用机制 |
| 2.3 MicroRNA在头颈鳞喉癌(HNSCC)中的异常表达及机制 |
| 2.4 MicroRNA在头颈鳞癌(HNSCC)转移中的作用及机制 |
| 2.5 MicroRNAs作为头颈鳞癌早期诊断标志物的研究 |
| 2.6 MicroRNA-488-3p |
| 2.7 MicroRNA对TROP2 的调控 |
| 3 CircRNA |
| 3.1 CircRNA的作用及机制 |
| 3.2 CircRNA与肿瘤 |
| 3.3 CircRNA在头颈鳞癌中的表达及作用机制 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（5）细胞凋亡抑制基因和促凋亡基因在喉鳞癌组织中的表达与临床意义（论文提纲范文）
| 材料、对象与方法 |
| 1研究对象 |
| 2试剂与仪器 |
| 3试验方法 |
| 3.1以免疫印迹法测定Bcl-2与Bax蛋白表达水平[4] |
| 3.2以免疫组化法 (SP) 测定bcl-2、Bax基因表达水平[5] |
| 3.3以SP法测定VEGF-C和凝血因子Ⅷ (FⅧ) 表达水平[5] |
| 4评价标准[6-7] |
| 5统计学处理 |
| 结果 |
| 1免疫印迹法测得Bcl-2蛋白与Bax蛋白在癌组织与癌旁正常组织的表达水平 |
| 2免疫组化法测得Bcl-2蛋白、Bax蛋白与VEGF-C蛋白在癌组织与癌旁正常组织的表达水平 |
| 3比较Bcl-2蛋白和Bax蛋白与喉鳞癌临床病理特征的关系 |
| 4相关性分析 |
| 5比较在癌组织与癌旁正常组织的MVD值 |
| 讨论 |
（6）USP9X、BCL-2在喉鳞癌组织中的表达及其相关性分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述：泛素特异性蛋白酶9X与肿瘤研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（7）RAGE对宫颈鳞癌生物学行为的影响及其相关机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 第一部分 RAGE的表达对宫颈鳞癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移等生物学行为的影响 |
| 引言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 RAGE的表达对宫颈癌细胞生物学行为影响的相关机制 |
| 引言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第三部分 RAGE对宫颈鳞癌细胞的成瘤性的影响及相关机制 |
| 引言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 RAGE在妇科肿瘤中的研究进展和应用前景 |
| 参考文献 |
| 中英文缩写对照 |
| 攻读学位期间本人出版或公开发表的论着、论文 |
| 致谢 |
（8）Bcl-2,E-cadherin,N-cadherin蛋白在喉鳞癌中的表达及临床意义（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 读研期间撰写的论文 |
| 主要缩略词英文索引 |
| 致谢 |
（9）S100A4、Bcl-2、Survivin在喉癌组织中的表达及临床意义（论文提纲范文）
| 1 临床资料 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（10）Galectin-3和VEGF在喉鳞癌中的表达以及十字孢碱诱导人喉癌细胞HEP-2细胞凋亡（论文提纲范文）
| 内容提要 |
| 缩写词表 |
| 第一部分：GALECTIN-3 和VEGF 在喉鳞癌中的表达 |
| 前言 |
| 1 Galectin-3 概述 |
| 2 VEGF 概述 |
| 3 本研究的意义 |
| 实验方法及结论 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分：十字孢碱诱导人喉癌细胞HEP-2细胞凋亡 |
| 前言 |
| 1 细胞凋亡 |
| 2 十字孢碱(Staurosporine) |
| 3 白藜芦醇与细胞凋亡 |
| 4 本研究的意义 |
| 实验方法及结论 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 致谢 |
四、bcl-2基因家族在喉鳞癌组织中的表达及意义（论文参考文献）
- [1]过表达HOXC11通过调控PPAE-γ和NF-κB通路促进头颈部鳞癌增殖和侵袭的研究[D]. 吕洁瑜. 南方医科大学, 2021(02)
- [2]转录因子FOXN3在急性髓系白血病中的作用及其致病机制研究[D]. 张津京. 中国医科大学, 2021(02)
- [3]MiR-196b靶向PCDH-17调控人喉鳞状细胞癌进展的机制研究[D]. 罗敏. 安徽医科大学, 2020(04)
- [4]TROP2在头颈肿瘤中的作用及其调控机制研究[D]. 郝延茹. 吉林大学, 2020(08)
- [5]细胞凋亡抑制基因和促凋亡基因在喉鳞癌组织中的表达与临床意义[J]. 刘雪梅,王翡. 中国临床药理学杂志, 2018(17)
- [6]USP9X、BCL-2在喉鳞癌组织中的表达及其相关性分析[D]. 冯燚源. 川北医学院, 2018(12)
- [7]RAGE对宫颈鳞癌生物学行为的影响及其相关机制[D]. 朱雪洁. 苏州大学, 2018(01)
- [8]Bcl-2,E-cadherin,N-cadherin蛋白在喉鳞癌中的表达及临床意义[D]. 袁恩健. 南华大学, 2014(02)
- [9]S100A4、Bcl-2、Survivin在喉癌组织中的表达及临床意义[J]. 齐志勇,贾永峰,张治平,朱林琳. 现代中西医结合杂志, 2014(09)
- [10]Galectin-3和VEGF在喉鳞癌中的表达以及十字孢碱诱导人喉癌细胞HEP-2细胞凋亡[D]. 康园园. 吉林大学, 2008(10)