一、大白菜核基因显性雄性不育性育性恢复基因的RAPD标记（论文文献综述）
张文翔[1]（2019）在《白菜薹细胞核雄性不育基因的定位》文中研究指明利用十字花科芸薹属白菜薹雄性不育系的育种是发挥其显着杂种优势最为理想的育种的方法。本试验所用白菜薹材料是课题组早年选育的湘薹‘SN-1’不育系,也是本试验中目的基因的供体。为充分发掘白菜薹雄性不育系的优势,推动白菜薹杂交育种进程,本试验在BSR-Seq的基础上,开发与目的基因紧密连锁的SSR标记,并对其进行定位,获得结果如下:本试验之前已经以湘薹‘SN-1’和大白菜DH系‘FT’为亲本构建育性分离群体,经F1群体性状鉴定可得:白菜薹不育基因与本课题组发现的大白菜不育基因的位点不同;经F2群体遗传分析可得:该不育基因是单基因核雄性不育基因;通过BSR-Seq技术,初步将白菜薹细胞核雄性不育基因定位在A01和A05染色体上;利用初步定位结果,结合大白菜数据库在候选区间内设计并筛选SSR引物,最终获得2个与目的基因紧密连锁的SSR引物:2[12]和three[11];并将白菜薹细胞核雄性不育基因定位在A01染色体2.99-6.5Mb区间内,该区间内含有618个候选基因。
任芳[2]（2016）在《大白菜核雄性不育基因Ms的精细定位及BAC文库筛选》文中指出大白菜核复等位基因遗传的雄性不育材料的发现,为核不育系的选育和利用开辟了新途径。本实验室前期已将大白菜核不育复等位基因中的Ms基因,初步定位在A07染色体上。本研究以大白菜核雄性不育“两用系”AB01中的不育植株为母本,与大白菜小孢子DH系FT杂交,杂交后代的不育株与FT回交,构建大规模BC1精细定位群体,在A07染色体上继续开发与不育基因Ms连锁更紧密的SSR标记。同时,构建大白菜基因组BAC文库,筛选定位区间所在的染色体片段,为克隆Ms基因奠定基础。主要研究结果如下：1.利用构建的BC1分离群体,筛选到了与Ms基因紧密连锁的SSR分子标记LZY6和RF37,其与目的基因Ms的遗传距离分别为0.45cM和0.62cM。RF37与LZY6之间的遗传距离为0.17cM,确定Ms基因在A07染色体上的方向。2.构建了含有51840个克隆的BAC文库,其单个孔的原始克隆数为540个,文库的菌株为大肠杆菌DH10B,采用的载体是plndigoBAC-5。对BAC文库质量进行鉴定,随机选取文库中的9个单克隆,经过摇菌、酶切等检测到单克隆的平均插入片段大小为160Kb。基因组覆盖率为15x,能筛到阳性单克隆的几率在99.9%以上。随机选取的9个单克隆都含有插入片段,空载率为0%。3.设计引物SKRF1,利用PCR对BAC文库进行阳性混合池、阳性孔、阳性单克隆的逐级筛选,获得了阳性单克隆SRF,其片段大小约为140Kb。对SRF进行第二代测序,拼接成5个scaffold,预测编码37个基因。对37个预测基因在大白菜数据库中搜索,其中11个基因来自数据库中的已知基因。对37个预测基因在拟南芥中进行同源搜索（Blastx, E<-10）其中18个基因可以找到同源基因,包括功能已知基因12个,功能未知基因6个。其余的19个基因在Nr数据库中搜索,能匹配到基因序列的有18个基因,包括功能已知基因1个,功能未知基因17个。
王秋实[3]（2013）在《乌塌菜和白菜台核复等位基因雄性不育系的创制与利用》文中指出乌塌菜和白菜薹是十字花科芸薹属A基因组的两种特色蔬菜,异花传粉,杂种优势显着。为了解决其杂种优势利用中的杂交制种手段问题,以复等位基因遗传的大白菜和奶白菜核基因雄性不育系为不育源,以乌塌菜和白菜薹高代自交系为转育目标品系,设计定向转育方案,采用杂交、回交和自交方法,在转育核不育复等位基因的同时转育园艺学性状,创制新的雄性不育系；探索将分子标记辅助选择技术应用于白菜薹核不育系转育,利用SSR标记鉴定目标植株的基因型；针对育成的乌塌菜雄性不育系花蕾败育问题,采用cDNA-AFLP技术分析了花蕾败育相关基因的差异表达特性。主要研究成果如下：1.利用奶白菜核复等位基因遗传的雄性不育系‘GMS-1’,与乌塌菜自交系‘WT01’杂交,通过对F1植株雄蕊育性的鉴定,确定乌塌菜转育目标品系在核不育位点上的基因型为MsfMsf。以此为基础设计了乌塌菜核基因雄性不育系定向转育方案,在连续4代回交转育园艺学性状的基础上,育成了具有100%不育株率和100%不育度、园艺学性状与转育目标品系‘WT01’相近的乌塌菜核基因雄性不育系‘GMS-3’。2.以育成的乌塌菜核基因雄性不育系为母本,与4个乌塌菜优良自交系配制杂交组合,以乌塌菜商品种’Vitamin’为对照进行品种比较试验,对杂交组合的整齐度、品质和产量进行分析。各杂交组合的植物学性状的整齐度高,可溶性糖、蛋白、Vc、有机酸、粗纤维以及微量元素含量均处于较高水平,大部分品质指标极显着高于对照。各杂交组合产量表现出明显的杂种优势,均显着高于对照品种。综合考察产量和品质性状,筛选出一个优良杂交组合C1。3.以乌塌菜核基因雄性不育系为试材,取5株植株一级分枝的正常开花期花蕾和败蕾期花蕾分别建立混合池,利用cDNA-AFLP技术和生物信息学技术分析败蕾过程中的表达差异基因。共筛选到64个与花蕾败育相关的差异表达片段（TDF）,片段大小在80-400bp之间。按照正常花蕾→败育花蕾的顺序,差异表达片段呈现出4类表达模式：a：有→无；b：无→有；c：强→弱；d：弱→强。其中,a类条带占43.0%,b类条带占36.5%,c类条带占10.8%,d类条带占9.7%。选取42个典型的TDF进行测序,获得的序列信息在BRAD和NCBI上进行同源性比对,其中同源性大于90%的TDF有16条,基因功能可分为8类：①能量与代谢相关的TDF1条；②逆境响应相关的TDF5条；③转录和翻译相关的TDF1条；④信号转导相关的TDF4条；⑤抗病与衰老相关的TDF2条；⑥氨基酸的合成与加工相关的TDF2条；⑦跨膜运输相关的TDF3条；⑧功能未知的TDF2条。4.利用大白菜核复等位基因遗传的雄性不育系‘GMS-2’,与白菜薹自交系‘Br02’杂交,根据F1植株育性调查结果确定白菜薹转育目标品系的基因型为MsfMsf。以此为依据设计了白菜薹核基因雄性不育系定向转育方案,并利用分子标记辅助选择技术筛选目标基因型植株。通过对本实验室前期开发的26对SSR引物的筛选鉴定,证明了GSSR1在双亲间具有多态性,且与显性雄性不育基因Ms共分离,同样可以标记同一位点恢复基因Msf和可育基因ms。在连续3代回交转育园艺学性状的基础上,育成了具有100%不育株率和100%不育度、园艺学性状与转育目标品系‘Br02’相近的白菜薹核基因雄性不育系‘GMS-4’。5.利用白菜薹核不育系GMS-4与6个白菜薹优良自交系配制杂交组合,对各个杂交组合的整齐度和小区产量进行测定。各杂交组合的整齐度均较高,产量优势明显。综合考察产量和其他园艺学性状,筛选出一个优良杂交组合C3。
吴国平[4]（2012）在《甜椒CMS育性相关基因的分子标记筛选与应用》文中指出辣椒（Capsicum annuum L.）是中国第二大蔬菜作物,栽培面积仅次于大白菜。辣椒作为常异花授粉作物,具有很强的杂种优势,优良一代杂种比常规种一般能够增产30%-50%。利用辣椒细胞质雄性不育系生产一代杂交种,可以省去人工去雄手续,简化制种程序,提高种子纯度等。辣椒细胞质雄性不育的研究一直受国内外广泛重视,利用细胞质雄性不育配制杂交种也成为了当今世界甜辣椒育种的热点。本研究以甜椒胞质雄性不育恢复系5-2R1和相应的保持系5-2为试材,利用SRAP、SCAR标记技术,以期筛选与甜椒CMS恢复基因相关的SRAP标记以及SCAR标记,利用SCAR特异引物对多份甜辣椒材料进行恢复基因验证,并对含有恢复基因的材料进行田间育性恢复调查;结合SRAP分子标记技术,比较分析甜椒细胞质雄性不育系CMST6A及其相应的保持系T6B的基因组差异,筛选与甜椒不育基因相关的特异片段。主要研究结果如下：1.甜椒胞质雄性不育恢复基因的SRAP及SCAR标记分析以甜椒胞质雄性不育恢复系5-2R1和相应的保持系5-2为试材,利用SRAP分子标记技术筛选与甜椒恢复基因相关的分子标记。128对SRAP引物组合共扩增获得了3796条从100bp至800bp大小不同的条带,平均每对引物组合可扩增出30条清晰的条带,共检测到4个多态性位点,其中恢复系材料仅有1个。对该特异片段进行回收、克隆和测序,结果表明该片段全长为259bp。经BLAST比对分析表明,该片段与烟草线粒体中的NADH脱氢酶第5亚基（GenBank:EF151914.1）具有81%的同源性；同时,该片段与辣椒BAC克隆PEPBAC158K24（GenBank:FJ597540.1）的部分序列高度同源。根据序列特点设计特异SCAR220引物,对恢复系和保持系进行扩增验证,仅在恢复系中扩增出目的条带,表明已成功地将此SRAP标记转化为简单、稳定的SCAR标记。我们推测本研究获得的SCAR220标记可能与胞质雄性不育恢复基因相关。2.甜椒恢复基因SCAR220标记的应用本文采用SCAR220标记对国内外引进的96份辣椒材料和34份甜椒材料进行分析,其中在32份甜（辣）椒材料中扩增出了220bp大小的特异条带。以上述130份甜（辣）椒材料和辣椒细胞质雄性不育系21A以及辽A为试材进行杂交,并对其杂交后代的育性进行田间鉴定。结果表明,96份辣椒材料中,有21份检测到了特异条带,但是仅有6份具有育性恢复能力,其中4份材料得到了SCAR220标记验证；14份转育的甜椒恢复系材料中,有8份检测到了特异条带；另外20份甜椒材料中,有3份材料扩增出了特异条带,但是仅有1份具有育性恢复能力,并且得到了SCAR220标记验证。说明恢复基因SCAR220标记具有一定的稳定性,可用作甜椒恢复系早期筛选手段之一。3.甜椒细胞质雄性不育基因的SRAP标记旨在筛选出甜椒细胞质雄性不育基因连锁的SRAP标记,为进一步深入研究甜椒细胞质雄性不育的分子机制奠定基础。本研究以甜椒细胞质雄性不育系CMST6A和相应的保持系T6B为试材,利用SRAP分子标记技术,筛选与甜椒雄性不育基因相关的特异片段。对特异片段进行回收、克隆和测序,并用blastn和blastx程序在NCBI数据库中进行同源性检索和相似性比对。128对SRAP引物组合共扩增获得了3844条100～1000bp的条带,平均每对引物组合可扩增出31条清晰的条带,共检测到3个多态性位点,其中不育系中仅有一个多态性条带,命名为CMS T6A201.用blastn程序进行核苷酸同源序列比较,此片段与Ty3-gypsy类逆转座子的部分序列高度同源；用blastx程序与蛋白质数据库进行同源性比对,由该片段推测的氨基酸序列与水稻假拟Ty3-gypsy逆转座子蛋白、蒺藜苜蓿的反转录酶、水稻gag-pol蛋白以及马铃薯的假拟gag-pol蛋白等相似性较高。由此推测,甜椒细胞质雄性不育系特异片段CMS T6A201的功能可能与逆转座子有关。
耿新翠[5]（2012）在《抗根肿病桔红心大白菜雄性不育系转育方法研究》文中认为根肿病（Plasmodiophora brassicae）严重威胁着大白菜等十字花科作物的生产，导致大白菜等十字花科蔬菜产量和质量急剧下降。桔红心大白菜〔Brassica campestrisL. ssp. pekinensis（Lour.）Olsson〕色泽鲜艳，营养丰富，保健价值高，本文以桔红心大白菜和普通心大白菜抗根肿病甲型雄性不育“两用系”为转育材料，进行了抗根肿病桔红心雄性不育系的转育方法研究，并对桔红心大白菜子叶颜色的遗传特征和作为形态标记性状的使用价值进行了探究。主要研究结果如下：1.通过莲座期对不同品种桔红心材料的叶片抱合方式、叶片平展还是褶皱、有无叶毛等特征的调查，得出124和125与CR9112A的叶片特征比较一致。收获时对桔红心材料经济性状的调查结果显示，123和125的球心色最理想。总起来看，只有125在各方面的性状表现最好，与待转育亲本CR9112A有较多相似性状，所以选125为桔红心亲本，CR9112A为抗源和不育源。对桔红心自交系125以及其与纯合抗性和杂合抗性植株杂交后代的抗性鉴定结果说明，桔红心自交系对根肿病没有抗性，抗性基因型为rr；利用甲型和乙型“两用系”不育株对桔红心自交系育性基因型的测定结果说明，其育性基因型为msms。2.以普通心抗根肿病大白菜甲型雄性不育“两用系”和桔红心大白菜自交系（LH）为材料，宏观上验证了抗性、育性和桔红心球心色三者的遗传关系，认为三者在遗传上遵循孟德尔的自由组合规律。根据这一规律和核不育“复等位基因”遗传假说，提出了抗根肿病桔红心大白菜100%雄性不育系的转育模式。在转育过程中，F1代回交实现桔红心球心色的纯化，BC1F1代重组纯化抗性，并得到了纯抗的甲型雄性不育“两用系”可育株和临时保持系，甲型雄性不育“两用系”可育株自交后代兄妹交，通过育性调查得到新甲型雄性不育“两用系”，甲型雄性不育“两用系”可育株自交后代不育株与临时保持系杂交得到100%核雄性不育系。转育时先进行抗性鉴定，再进行球心色鉴定和经济性状调查，最后进行育性鉴定。3.以桔红心大白菜自交系（LH）、普通心大白菜自交系（9112）做亲本对桔红心大白菜子叶颜色的遗传特征和在环境中的稳定性进行了研究，研究结果表明：桔红心和普通心大白菜正反交后代（F1和F1′）子叶颜色均为黄色，F2和BC1F1子叶颜色分离比分别为3:1和1:1（黄色子叶:桔红子叶），这说明桔红心子叶颜色由1对等位核基因控制，与细胞质无关，桔红色对黄色表现为隐性；子叶颜色、花色和球心色三者的遗传表现为一因多效，即桔红子叶植株球心色和花色也为桔红色。在遮光或者弱光处理结束后，光照2h桔红心子叶的颜色可以稳定表现，在低温遮光条件下表现最为显着，催芽时间不同（24h或48h）不影响桔红心子叶颜色的表现。因此，子叶颜色可以作为桔红心大白菜选育中的一个理想的形态标记加以应用。4.以桔红心的子叶颜色作为形态标记，BC1F1代的桔红子叶幼苗经抗性鉴定得到抗病桔红心植株，经过杂交重组，在BC1F2代得到含有甲型雄性不育“两用系”可育株基因型的抗病桔红心群体。该群体自交后通过抗性鉴定和育性调查筛选到纯合抗病的桔红心甲型雄性不育“两用系”，自交后代进行兄妹交，可育株同时进行测交，通过测交结果得到了纯合抗病的桔红心甲型雄性不育“两用系”。子叶法筛选桔红心植株时期较早，可以在抗性鉴定前完成，因此只有桔红心植株进行抗性鉴定，即抗性鉴定植株减少。不仅如此，经济性状调查时不包括普通心植株，调查群体也减少。5.转育抗根肿病桔红心不育系以普通心抗病甲型雄性不育“两用系”与桔红心自交系杂交，F1兄妹交抗性和育性同步纯化，第4代得到雄性不育系，比回交模式提前一代。第二代筛选抗根肿病桔红心植株时，球心色法在结球期调查经济性状调查时确定桔红心的，花色法开花时球心色调查和育性调查同时进行，子叶法球心色、抗性、经济性状、育性逐一筛选。无论是BC1F1代还是F2代，子叶法的抗性鉴定群体和经济性状调查群体都是最小，降低了转育过程中的工作强度，所以，三种方法中，子叶法适用范围广，最经济，是筛选桔红心抗病品种和雄性不育系的理想方法。
于娜娜,张鲁刚,孙希禄,许小勇,万恩梅,张静[6]（2011）在《SCAR标记辅助的大白菜雄性不育系定向转育》文中进行了进一步梳理以含有不育基因Ms的大白菜核不育杂交一代、回交一代和可育株自交一代为检测群体,利用与不育基因Ms紧密连锁的5个SCAR标记对群体进行标记的适用性检测并对可育株的基因型进行鉴定。结果表明,标记syau-scr02和syau-scr03仅扩增出没有差异的弱带;syau-scr04和syau-scr05在可育池和不育池中均能扩增出目的片段,多态性消失;只有标记syau-scr01在09H12群体中具有明显的多态性,其重组交换率为2.97%,遗传距离为2.15 cM,表明其可用于后期的标记辅助选择。经标记检测初步推断,全可育杂一代09H9和09H10材料的育性分离后代中可育单株的基因型为MfSMS,4份育性1∶1分离材料的分离后代中可育株的基因型为msms。以此为根据设计新的转育方案,以期在后续试验中得到新核不育系、乙型两用系和甲型两用系,并通过与标记syau-scr01相结合筛选与可育基因msms或MsfMsf相连锁的新标记。
杨宁[7]（2011）在《芸薹属A基因组4种特色叶菜核基因雄性不育系的创制》文中研究指明为解决芸薹属A基因组4种特色叶菜杂种优势利用中的杂交制种手段问题,以本课题组早期育成的核不育复等位基因遗传的白菜核基因雄性不育系为不育源,设计定向转育方案,开展4种蔬菜作物核基因雄性不育系的转育方法研究,获得了下列结果：1.以奶白菜核基因雄性不育系GMS3为测交系,鉴定转育目标品系苗用白菜‘宫古花蕊’自交系Y02的基因型,证明了其在核不育复等位基因位点上的基因型为纯合显性恢复基因型MsfMsf。以奶白菜核基因雄性不育系GMS3为不育源,设计定向转育方案,向‘宫古花蕊’自交系Y02中转育核不育基因,育成了稳定遗传、植物学性状和经济性状与‘宫古花蕊’自交系Y02相近、具有100%不育株率和100%不育度的新的核基因雄性不育系A01及其相应的甲型“两用系”和临时保持系。在不育系转育过程中,利用本课题组早期开发的与不育基因Ms连锁的SCAR标记syauscr04,鉴定选择含有不育基因Ms的植株,准确率达到了100%,验证了该标记可用于核复等位基因型雄性不育系转育中的辅助选择。以定向转育获得的新的核基因雄性不育系A01为母本,8个苗用白菜自交系为父本,配制杂交组合,进行品种比较试验,筛选出2个优良杂交组合D3和D4。2.利用早熟大白菜甲型“两用系”ABo1的不育株与转育目标品系矮脚黄白菜自交系Y0701测交,根据后代的育性分离比率,鉴定出Y0701在核不育复等位基因位点上的基因型为MsfMsf。以早熟大白菜甲型“两用系”AB01及其临时保持系Bo1为不育源材料,矮脚黄白菜自交系Y0701为转育品系,设计合成转育方案,选育矮脚黄白菜雄性不育系,获得了不育株率和不育度均为100%的新的核基因雄性不育系GMS00及其相应的甲型“两用系”和临时保持系；以同样的试材,设计定向转育方案,分别经过2次回交4次回交,转育成了新的核基因雄性不育系GMS02和GMS04,其不育株率和不育度也均达到了100%。通过新不育系GMS00、GMS02和GMS04与目标品系Y0701比较鉴定,发现GMS00的园艺学性状介于不育源ABo1与目标品系Y0701之间,GMS02和GMS04的整齐性优于GMS00,而且回交4代转育成的核不育系GMS04在园艺学性状上已经十分接近于矮脚黄白菜自交系Y0701,说明达到了定向转育的效果。以育成的新核不育系GMS00、GMS02和GMS04为母本,2个矮脚黄白菜自交系品种为父本配制杂交组合,进行品种比较试验,筛选出1个优良杂交组合PB401。3.以奶白菜核基因雄性不育系GMS3为测交系,鉴定蕾用白菜自交系Y01的基因型,证明了其在核不育复等位基因位点上的基因型为MsfMsf。以GMS3为不育源,设计定向转育方案,向蕾用白菜自交系Y01中转育核不育基因,育成了稳定遗传、植物学性状和经济性状与蕾用白菜自交系Y01相近、具有100%不育株率和100%不育度的新的核基因雄性不育系A02及其相应的甲型“两用系”和临时保持系。4.以奶白菜核基因雄性不育系GMS3为不育源,设计定向转育方案,向小菘菜自交系Y05中转育核不育基因,育成了稳定遗传、植物学性状和经济性状与待转育品系Y05相近、具有100%不育株率和100%不育度的新的核基因雄性不育系A03及其相应的甲型“两用系”和临时保持系。
于娜娜[8]（2011）在《大白菜核不育基因分子标记研究》文中研究说明大白菜（Brassica campestris L.ssp.pekinensis）是原产于我国的特产蔬菜,由于其细胞核雄性不育遗传复杂,转育难度大成为阻碍其广泛应用的瓶颈。分子育种技术为大白菜雄性不育系的利用提供了新的途径,本研究以西北农林科技大学园艺学院白菜课题组选育的大白菜核不育杂交一代和回交一代为研究对象,进行了基因型鉴定、分子标记及转育方案研究,主要取得了以下结果:1、明确了大白菜自交系05S781和05S938的基因型为MsfMsf ;05S1719的基因型为msms;06J32的基因型为msms或Msfms。2、利用80个RAPD引物对材料09H12的可育池DNA和不育池DNA进行PCR扩增,其中8个引物（S61、S145、S179、S258、S567、S761、S1250、S1398）不能扩增出任何带型;4个引物（S184、S927、S1211、S1327）可以在可育池DNA和不育池DNA中检测到差异带存在,但是重复验证中差异条带消失,稳定性差;其余68个引物在可育株DNA池和不育株DNA池中能分别扩增出2条到7条不等的DNA条带,但是在两个DNA池内找不到差异条带。3、依照已经报道的相关引物序列设计了5对SCAR引物,经过检测发现只有引物scr01在09H12群体的不育池和可育池中之间存在明显的多态性,在不育DNA池中可扩增出差异条带syau-scr01,而在可育DNA池中则不能得到该差异条带。进一步在09H12群体的337个单株中进行检测,经计算在09H12群体中,syau-scr01与不育基因的遗传距离为2.15cM。利用标记syau-scr01对群体09H2、09H3、09H5、09H6、09H7、09H11的可育植株基因组DNA进行检测,结果显示,所有可育株的不育位点上均未检测到有syau-scr01标记。4、根据“06J32”的基因型,结合syau-scr01标记设计了两种转育方案,以期在后续试验中得到新的甲型两用系、乙型两用系和新核不育系。同时,利用syau-scr01标记在自交系05S781和05S938的杂交后代中选择带有不育基因的可育株,通过测交、杂交与标记选择结合得到新的核不育系;在后期选育过程中,通过建立msms、Msfms、MsfMsf三个DNA池,可以筛选得到与可育基因相关的新标记。
孙希禄[9]（2011）在《大白菜细胞质雄性不育AFLP分析及花蕾内源激素研究》文中研究表明雄性不育机理研究随着生物技术方法改进而不断深入,同时也取得了巨大的进步,但要完全清楚其内在机理还有很长的路要走。细胞质雄性不育较细胞核雄性不育在杂种生产上的应用潜力更大,但由于细胞质不育非常复杂,涉及核质互作,同时受环境因素的影响,导致研究进展滞后。本研究从两个方面着手进行雄性不育研究:首先是利用分子生物学方法,通过AFLP技术对大白菜细胞质雄性不育近等基因系进行分析,筛选与大白菜细胞质雄性不育紧密连锁的标记,为将来分子辅助育种服务;其次是研究了不同发育阶段花蕾内源激素的含量变化，从而探索内源激素与雄性不育的关系饕峁?下:1.以通过PstⅠ和MseⅠ双酶切后,加上接头的混合池DNA为样品,进行AFLP分析。通过对1024对引物的筛选,发现引物p12/m33和p16/m50在不育池和可育池中重复扩增到稳定的差异条带,表现为可育池有,而不育池没有相应的条带。经过建池单株检测验证后,回收差异片段,进行测序,结果表明引物p12/m33和p16m/50扩增的差异片段长度分别为73bp和61bp,命名为p12/m33-73和p16m/50-61。2.通过对分离群体检测,利用Joinmap3.0软件,计算得出分子标记p12/m33-73和p16/m50-61与育性基因之间的遗传距离分别是2.489cM和5.513cM。3.试验发现在不育花蕾败育发生的初始阶段,ABA和JA分别上升了12.47%和16.18%,而IAA、ZR和GA3分别下降了14.00%、23.04%和45.68%。推测IAA、ZR和GA3亏缺可能是导致雄性不育的原因之一。4.在花蕾发育过程中,不育株与可育株间花蕾中的IAA/ABA、IAA/ZR、IAA/GA3和GA3/ABA的变化趋势不一致,且比值大小差异很大,在不育发生的初始阶段,IAA/ABA、IAA/GA3和GA3/ABA平衡失调可能与雄性不育有关。
王丽丽,魏鹏,刘志勇,李承彧,王玉刚,冀瑞琴,冯辉[10]（2010）在《大白菜显性核复等位基因雄性不育恢复基因Msf的SSR标记》文中进行了进一步梳理为筛选大白菜核复等位基因遗传的雄性不育恢复基因Msf的SSR标记,用基因型为MsfMs的雄性不育两用系‘AB01’的可育株自交,得到恢复基因型纯合个体MsfMsf。再用其与基因型为msms的自交系‘a20’杂交和连续回交,获得BC4分离群体。筛选了104对SSR引物,获得3个与雄性不育恢复基因Msf连锁的SSR标记syaum13、syaum14和BRMS-040。经群体验证和连锁分析,Msf基因位于R07连锁群上,3个标记位于Msf基因的同一侧,距Msf基因的遗传距离分别为6.7、6.7和8.6cM。
二、大白菜核基因显性雄性不育性育性恢复基因的RAPD标记（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、大白菜核基因显性雄性不育性育性恢复基因的RAPD标记（论文提纲范文）
（1）白菜薹细胞核雄性不育基因的定位（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1.1 白菜薹的概述 |
| 1.2 芸薹属植物雄性不育的研究 |
| 1.3 芸薹属作物细胞核雄性不育的分子生物学研究进展 |
| 1.3.1 分子标记技术的概述 |
| 1.3.2 芸薹属作物细胞核雄性不育的分子生物学研究进展 |
| 1.4 本研究的目的意义及技术路线 |
| 1.4.1 目的与意义 |
| 1.4.2 本试验的技术路线 |
| 基于BSR-Seq的白菜薹细胞核雄性不育基因的定位 |
| 2.1 试验材料与方法 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 实验材料花器形态观察 |
| 2.1.3 冷冻切片 |
| 2.1.4 BSR-Seq流程 |
| 2.1.5 SSR标记的合成与筛选 |
| 2.1.6 DNA的提取 |
| 2.1.7琼脂糖凝胶电泳实验 |
| 2.1.8 PCR扩增 |
| 2.1.9 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验 |
| 2.1.10 主要仪器 |
| 2.1.11 酶及试剂 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 测序数据质量分析 |
| 2.2.2 参考序列比对分析 |
| 2.2.3 SNV和 InDel分析 |
| 2.2.4 基因表达分析 |
| 2.2.5 RNA-seq整体质量评估 |
| 2.2.6 基因差异表达分析 |
| 2.2.7 目标性状区域定位 |
| 2.2.8 白菜薹细胞核雄性不育基因染色体定位 |
| 讨论与结论 |
| 3.1 讨论 |
| 3.2 结论 |
| 3.3 本研究的后续工作 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（2）大白菜核雄性不育基因Ms的精细定位及BAC文库筛选（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 植物雄性不育 |
| 1.1.1 植物雄性不育的起因 |
| 1.1.2 植物雄性不育基因的类型 |
| 1.1.3 大白菜核雄性不育复等位基因的研究现状 |
| 1.1.4 分子标记在芸薹属作物雄性不育上的应用 |
| 1.2 基因组文库 |
| 1.2.1 λ噬菌体文库 |
| 1.2.2 Cosmid文库 |
| 1.2.3 YAC文库 |
| 1.2.4 PAC文库 |
| 1.2.5 BAC文库 |
| 1.2.6 BAC文库的鉴定 |
| 1.2.7 BAC文库的筛选方法 |
| 1.2.8 BAC文库的应用 |
| 1.3 本研究的目的与意义 |
| 第二章 大白菜核雄性不育基因Ms的SSR标记 |
| 2.1. 材料与方法 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 分离群体的构建 |
| 2.1.3 基因组DNA的提取 |
| 2.1.4 PCR扩增反应体系 |
| 2.1.5 电泳及银染 |
| 2.1.6 Ms基因连锁标记的筛选 |
| 2.1.7 连锁遗传分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 大白菜基因组总DNA的提取 |
| 2.2.2 SSR引物的设计与亲本多态性筛选 |
| 2.2.3 SSR标记在群体间的单株验证 |
| 2.2.4 核不育基因Ms定位 |
| 2.3 小结 |
| 第三章 大白菜“两用系”AB01基因组BAC文库的筛选 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 植物材料 |
| 3.1.2 菌株与载体 |
| 3.1.3 AB01不育株基因组BAC文库的构建 |
| 3.1.4 BAC文库的鉴定 |
| 3.1.5 筛选文库引物的设计 |
| 3.1.6 BAC文库一级列混合池的构建与筛选 |
| 3.1.7 BAC文库阳性孔的筛选 |
| 3.1.8 单克隆的筛选 |
| 3.1.9 阳性单克隆测序分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 BAC文库的相关参数 |
| 3.2.2 BAC文库质量鉴定 |
| 3.2.3 BAC文库PCR筛选程序及结果 |
| 3.2.4 阳性单克隆的测序结果分析 |
| 3.3 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
（3）乌塌菜和白菜台核复等位基因雄性不育系的创制与利用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 十字花科作物雄性不育研究进展 |
| 1.1.1 雄性不育的类型 |
| 1.1.2 细胞质雄性不育 |
| 1.1.3 细胞核雄性不育 |
| 1.2 cDNA-AFLP技术的研究进展 |
| 1.2.1 cDNA-AFLP技术的原理与流程 |
| 1.2.2 cDNA-AFLP技术的特点 |
| 1.2.3 cDNA-AFLP技术在基因差异表达中的应用 |
| 1.3 分子标记辅助选择技术研究进展 |
| 1.3.1 分子标记辅助选择的优势 |
| 1.3.2 分子标记辅助选择的前提 |
| 1.3.3 分子标记辅助选择在植物育种中的应用 |
| 1.4 本研究的目的与意义 |
| 第二章 乌塌菜核复等位基因雄性不育系的定向转育 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 转育亲本基因型的确定 |
| 2.2.2 定向转育遗传模式 |
| 2.2.3 转育结果分析 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 乌塌菜核不育系的定向转育效果评价 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 试验方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 雄性不育系育性鉴定结果 |
| 3.2.2 雄性不育系杂交组合的配制 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 乌塌菜核不育系花蕾败育相关基因的差异表达分析 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料与试剂 |
| 4.1.2 试验方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 总RNA质量的检测 |
| 4.2.2 cDNA第一链合成结果 |
| 4.2.3 cDNA第二链合成结果 |
| 4.2.4 预扩增结果 |
| 4.2.5 选择性扩增多态性分析 |
| 4.2.6 差异片段的同源性分析 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 利用分子标记辅助选育白菜薹核基因雄性不育系 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 材料与试剂 |
| 5.1.2 试验方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 转育亲本基因型的确定 |
| 5.2.2 验证SSR引物的多态性 |
| 5.2.3 定向转育遗传模式 |
| 5.2.4 “两用系”方向各回交世代植株基因型的鉴定 |
| 5.2.5 “临时保持系”方向各回交世代植株基因型的鉴定 |
| 5.2.6 白菜薹核基因雄性不育系的获得 |
| 5.3 讨论 |
| 第六章 白菜薹核基因雄性不育系定向转育效果评价 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 实验材料 |
| 6.1.2 试验方法 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 不育系的育性稳定性 |
| 6.2.2 不育系植物学性状鉴定结果 |
| 6.2.3 杂交组合性状调查结果 |
| 6.2.4 杂交组合整齐性分析结果 |
| 6.2.5 杂交组合产量配合力分析结果 |
| 6.3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 图版 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
| 论文图表统计 |
（4）甜椒CMS育性相关基因的分子标记筛选与应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表 |
| 引言 |
| 上篇 文献综述 |
| 第一章 植物雄性不育研究概况 |
| 1 雄性不育的概念 |
| 2 雄性不育的来源 |
| 2.1 自然突变 |
| 2.2 人工诱变 |
| 2.3 种间杂交 |
| 2.4 细胞工程和基因工程 |
| 3 雄性不育的分类 |
| 3.1 根据表型特征分类 |
| 3.1.1 结构性雄性不育 |
| 3.1.2 孢子发生性雄性不育 |
| 3.1.3 功能性雄性不育 |
| 3.1.4 部位不育 |
| 3.2 根据基因型差异分类 |
| 3.2.1 核雄性不育型 |
| 3.2.2 质雄性不育型 |
| 3.2.3 核质互作雄性不育型 |
| 4 CMS的分子生物学研究 |
| 4.1 叶绿体与CMS的关系 |
| 4.2 线粒体与CMS的关系 |
| 4.2.1 线粒体特异开放阅读框与雄性不育 |
| 4.2.2 线粒体能量代谢相关基因与雄性不育 |
| 4.3 恢复基因与CMS |
| 4.3.1 影响CMS相关基因转录本 |
| 4.3.2 影响CMS相关基因转录加工和编辑 |
| 4.3.3 影响转录本的翻译 |
| 4.3.4 改变线粒体DNA组成 |
| 5 CMS在生产上的应用 |
| 参考文献 |
| 第二章 分子标记在植物遗传育种中的应用 |
| 1 遗传标记的发展概况 |
| 1.1 形态标记 |
| 1.2 细胞标记 |
| 1.3 生化标记 |
| 1.4 分子标记 |
| 2 分子标记的种类 |
| 2.1 基于DNA-DNA杂交的分子标记 |
| 2.1.1 RFLP |
| 2.1.2 VNTR |
| 2.2 基于PCR的分子标记 |
| 2.2.1 随机引物PCR分子标记 |
| 2.2.2 特异引物PCR分子标记 |
| 2.3 基于PCR与限制性酶切的分子标记 |
| 2.3.1 AFLP |
| 2.3.2 CAPS |
| 2.4 基于DNA芯片技术的分子标记 |
| 3 分子标记在植物遗传育种中的应用 |
| 3.1 遗传多样性分析 |
| 3.2 构建遗传图谱 |
| 3.3 数量性状基因位点分子标记应用 |
| 3.4 质量性状基因的分子标记辅助选择 |
| 参考文献 |
| 下篇 研究报告 |
| 第三章 甜椒胞质雄性不育恢复系SRAP及SCAR标记分析 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 叶片基因组DNA的提取 |
| 1.5 基因池的构建 |
| 1.6 SRAP分析 |
| 1.6.1 SRAP扩增 |
| 1.6.2 扩增产物的电泳检测 |
| 1.7 特异条带的回收、纯化、克隆和测序 |
| 1.7.1 回收和纯化 |
| 1.7.2 克隆和测序 |
| 1.8 SCAR标记的转化 |
| 2 结果和分析 |
| 2.1 SRAP的PCR扩增分析 |
| 2.2 差异片段的测序及序列分析 |
| 2.3 SRAP标记转化为SCAR标记 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 甜椒恢复基因SCAR_(220)标记的应用 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 主要仪器和试剂 |
| 1.3 叶片基因组DNA的提取 |
| 1.4 SCAR分析所有甜辣椒材料 |
| 1.4.1 SCAR扩增 |
| 1.4.2 琼脂糖凝胶电泳检测 |
| 1.5 田间育性恢复鉴定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 基因组DNA的提取 |
| 2.2 SCAR_(220)在甜(辣)椒材料中的扩增 |
| 2.3 杂种一代的育性调查 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 甜椒细胞质雄性不育基因的SRAP标记 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 主要仪器和试剂 |
| 1.3 叶片基因组DNA的提取 |
| 1.4 SRAP分析 |
| 1.5 差异片段的回收、纯化、克隆和测序分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 基因组DNA的提取 |
| 2.2 SRAP特异片段的筛选 |
| 2.3 SRAP差异片段的测序及序列分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 创新之处 |
| 论文发表 |
| 致谢 |
（5）抗根肿病桔红心大白菜雄性不育系转育方法研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 十字花科植物根肿病 |
| 1.2 根肿病的抗源筛选与抗性遗传规律 |
| 1.3 抗根肿病育种 |
| 1.4 核基因雄性不育 |
| 1.5 桔红心大白菜的研究进展 |
| 1.6 遗传标记在育种中的应用 |
| 1.7 本研究的目的和意义 |
| 第二章 桔红心大白菜田间经济性状调查和抗性、育性鉴定 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 不同品种桔红心大白菜经济性状比较 |
| 2.2.2 桔红心抗性基因鉴定 |
| 2.2.3 桔红心育性基因鉴定 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 抗根肿病桔红心大白菜雄性不育系转育研究 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 桔红心大白菜球心色与花色的遗传关系 |
| 3.2.2 桔红心、抗性、育性遗传关系的验证 |
| 3.2.3 抗根肿病桔红心大白菜不育系的转育 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 大白菜球心色的遗传 |
| 3.3.2 抗性、育性和球心色的遗传关系 |
| 3.3.3 抗根肿病桔红心不育系的转育 |
| 3.3.4 根肿病抗性的应用局限性 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 桔红心大白菜形态标记的遗传和稳定性研究 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 桔红心大白菜子叶颜色的遗传特征 |
| 4.2.2 桔红心子叶颜色在不同条件下的稳定性 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 桔红心大白菜子叶颜色的遗传 |
| 4.3.2 桔红心子叶颜色的稳定性 |
| 4.3.3 桔红子叶作为形态标记的特点 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 桔红子叶在抗根肿病桔红心甲型“两用系”转育中的应用 |
| 5.1 材料和方法 |
| 5.1.1 材料 |
| 5.1.2 方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 抗根肿病桔红心大白菜甲型“两用系”的转育模式 |
| 5.2.2 抗根肿病桔红心大白菜甲型“两用系”的转育过程 |
| 5.2.3 球心色法和子叶法筛选抗根肿病桔红心的植株的过程比较 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 本章小结 |
| 第六章 抗根肿病桔红心大白菜核不育系转育方法研究 |
| 6.1 材料和方法 |
| 6.1.1 材料 |
| 6.1.2 方法 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 抗根肿病桔红心不育系转育模式 |
| 6.2.2 抗根肿病桔红心筛选过程 |
| 6.2.3 筛选抗病桔红心各步骤调查群体 |
| 6.2.4 不同方法、不同材料根肿菌菌土用量比较 |
| 6.2.5 不同方法、不同材料调查时间和调查群体比较 |
| 6.3 讨论 |
| 6.3.1 根肿病桔红心大白菜不育系的转育方法 |
| 6.3.2 根肿病桔红心桔红心筛选方法比较 |
| 6.4 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 图版 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表文章 |
（6）SCAR标记辅助的大白菜雄性不育系定向转育（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 群体的构建 |
| 1.2 基因组DNA的提取 |
| 1.3 引物设计及扩增体系 |
| 1.4 09H12群体中SCAR标记的适应性验证 |
| 1.5 SCAR标记辅助的雄性不育系定向转育 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 杂交一代群体的育性调查 |
| 2.2 大白菜基因组DNA的品质检测 |
| 2.3 SCAR标记在核不育09H12群体中的适用性检测 |
| 2.4 其他群体育性调查及可育株不育位点Ms基因的检测 |
| 2.5 标记辅助的大白菜雄性不育系转育方案 |
| 2.5.1 可育品系“06J32”的转育方案 |
| 2.5.2 全可育杂交一代09H10和09H9的利用方案 |
| 3 讨 论 |
（7）芸薹属A基因组4种特色叶菜核基因雄性不育系的创制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 雄性不育的特征与类型 |
| 1.1.1 细胞质雄性不育 |
| 1.1.2 细胞核雄性不育 |
| 1.2 核基因雄性不育研究概况 |
| 1.2.1 核基因雄性不育的来源 |
| 1.2.2 核基因雄性不育的特征 |
| 1.2.3 核基因雄性不育的遗传机制 |
| 1.2.4 核雄性不育基因的分子标记 |
| 1.3 核基因雄性不育系在杂种优势中的利用 |
| 1.4 本研究的目的与意义 |
| 第二章 ‘宫古花蕊’白菜核基因雄性不育系的创制 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 待转育品系基因型鉴定 |
| 2.2.2 分子标记辅助转育技术路线 |
| 2.2.3 核不育系的转育 |
| 2.2.4 不育系转育效果分析 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 矮脚黄白菜核基因雄性不育系的创制 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 转育目标品系基因型的鉴定 |
| 3.2.2 合成转育研究 |
| 3.2.3 定向转育研究 |
| 3.2.4 核不育系转育效果分析 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 蕾用白菜核基因雄性不育系定向转育研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 蕾用白菜可育品系基因型的鉴定 |
| 4.2.2 蕾用白菜核基因雄性不育系的选育 |
| 4.2.3 新不育系田间性状调查 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 小菘菜核基因雄性不育系定向转育研究 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 材料 |
| 5.1.2 方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 小菘菜可育品系基因型的鉴定 |
| 5.2.2 小菘菜核基因雄性不育系的选育 |
| 5.2.3 新不育系田间性状调查 |
| 5.3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附图版 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（8）大白菜核不育基因分子标记研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 大白菜雄性不育遗传规律研究进展 |
| 1.1.1 细胞核雄性不育类型(GMS) |
| 1.1.2 白菜核质互作雄性不育类型(CMS) |
| 1.2 大白菜分子标记研究进展 |
| 1.2.1 分子标记发展进程 |
| 1.2.2 大白菜分子标记研究进展 |
| 1.3 分子标记辅助育种研究进展 |
| 1.4 本研究的目的意义 |
| 第二章 大白菜核不育材料基因型鉴定 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 杂交一代群体的育性调查结果 |
| 2.3.2 回交一代和F2 群体育性调查结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 大白菜核不育基因的RAPD 标记分析 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 试材 |
| 3.1.2 酶及试剂 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 大白菜幼叶DNA 的提取与纯化 |
| 3.2.2 引物筛选 |
| 3.2.3 扩增产物的检测 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 大白菜基因组DNA 的质量检测 |
| 3.3.2 RAPD 标记分析 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 大白菜核不育SCAR 标记验证 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 植物材料 |
| 4.1.2 酶及试剂 |
| 4.1.3 主要仪器 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 DNA 的提取与纯化 |
| 4.2.2 引物设计及SCAR 扩增 |
| 4.2.3 扩增产物的检测与数据处理 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 SCAR 标记在核不育09H12 群体中的适用性检测 |
| 4.3.2 其他分离群体中可育株不育位点Ms 基因的检测 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 SCAR 标记辅助的大白菜雄性不育系转育 |
| 5.1 材料 |
| 5.2 转育方案设计 |
| 5.2.1 转育获得06J32 的甲型两用系、乙型两用系和新核不育系 |
| 5.2.2 全可育材料05S781、05S938 的定向转育 |
| 5.3 讨论 |
| 第六章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（9）大白菜细胞质雄性不育AFLP分析及花蕾内源激素研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 植物雄性不育的研究利用 |
| 1.2.1 雄性不育的来源 |
| 1.2.1.1 自然突变 |
| 1.2.1.2 自交和品种间杂交 |
| 1.2.1.3 近源不育源的回交转育 |
| 1.2.1.4 远源不育源的原生质体融合 |
| 1.2.1.5 物理化学诱变 |
| 1.2.2 雄性不育的特征特性 |
| 1.2.2.1 植物雄性不育的形态学观察 |
| 1.2.2.2 植物雄性不育的细胞学研究 |
| 1.2.3 植物激素与雄性不育 |
| 1.2.3.1 雄性不育与外源激素的关系 |
| 1.2.3.2 雄性不育与内源激素的关系 |
| 1.3 雄性不育分子标记 |
| 1.3.1 分子标记的种类 |
| 1.3.2 分子标记的特点 |
| 1.3.3 分子标记在雄性不育研究中的应用 |
| 1.4 植物基因分离中的图位克隆技术 |
| 1.4.1 图位克隆的原理与技术环节 |
| 1.4.2 细胞质雄性不育育性基因的克隆 |
| 1.5 本研究的目的意义 |
| 1.6 AFLP 分析技术路线 |
| 第二章 大白菜细胞质雄性不育AFLP 分析 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 酶及试剂 |
| 2.1.3 仪器设备 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 大白菜总DNA 的提取及纯化 |
| 2.2.2 BSA 法构建DNA 可育池与不育池 |
| 2.2.3 AFLP 方法 |
| 2.2.3.1 DNA 酶切、连接反应 |
| 2.2.3.2 预扩增、选择性扩增反应 |
| 2.2.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
| 2.2.4.1 聚丙烯酰胺凝胶制备 |
| 2.2.4.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
| 2.2.4.3 硝酸银染色 |
| 2.2.5 聚丙烯酸胺凝胶多态性片段回收 |
| 2.2.6 目的片段的克隆、测序 |
| 2.2.6.1 连接 |
| 2.2.6.2 转化 |
| 2.2.6.3 菌液PCR 检测 |
| 2.2.6.4 差异片段序列测定 |
| 2.2.7 差异片段的生物信息学分析及连锁性分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 大白菜基因组DNA 的提取质量 |
| 2.3.2 预扩增结果检测 |
| 2.3.3 多态性引物筛选 |
| 2.3.4 聚丙烯酰胺凝胶差异片段回收与二次扩增 |
| 2.3.5 差异片段的克隆、测序 |
| 2.3.6 序列比对分析 |
| 2.3.7 扩大群体验证，遗传距离及连锁性分析和SCAR 标记转化 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 AFLP 标记内切酶的选择 |
| 2.4.2 AFLP 扩增中应注意的问题 |
| 2.4.3 聚丙烯酰胺凝胶差异片段回收 |
| 2.4.4 SCAR 标记转化 |
| 第三章 大白菜雄性不育花蕾内源激素含量研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 内源激素含量的动态变化 |
| 3.3.1.1 玉米素核苷(ZR)含量的动态变化 |
| 3.3.1.2 吲哚乙酸(IAA)含量的动态变化 |
| 3.3.1.3 脱落酸(ABA)含量的动态变化 |
| 3.3.1.4 赤霉素(GA_3)含量的动态变化 |
| 3.3.1.5 茉莉酸(JA)含量的动态变化 |
| 3.3.2 内源激素之间的平衡关系 |
| 3.3.2.1 生长素(IAA)与脱落酸(ABA)比值变化 |
| 3.3.2.2 生长素(IAA)与玉米素核苷(ZR)比值变化 |
| 3.3.2.3 生长素(IAA)与赤霉素(GA_3)比值变化 |
| 3.3.2.4 脱落酸(ABA)与赤霉素(GA_3)比值变化 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 内源激素含量与雄性不育的关系 |
| 3.4.2 激素比值与雄性不育的关系 |
| 3.4.3 雄性不育激素研究的取样问题 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（10）大白菜显性核复等位基因雄性不育恢复基因Msf的SSR标记（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 SSR引物筛选 |
| 1.3 群体构建 |
| 1.4 DNA提取及PCR分析 |
| 1.5 遗传连锁分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 大白菜核复等位基因型雄性不育的遗传特性 |
| 2.2 自交系‘a20’基因型鉴定 |
| 2.3 BC4群体单株育性鉴定结果 |
| 2.4 恢复基因Msf标记的筛选及在亲本和F1间的多态性 |
| 2.5 BC4群体单株检验及遗传距离计算结果 |
| 2.6 恢复基因Msf的遗传连锁图谱 |
| 3 讨论 |
四、大白菜核基因显性雄性不育性育性恢复基因的RAPD标记（论文参考文献）
- [1]白菜薹细胞核雄性不育基因的定位[D]. 张文翔. 沈阳农业大学, 2019(02)
- [2]大白菜核雄性不育基因Ms的精细定位及BAC文库筛选[D]. 任芳. 沈阳农业大学, 2016(02)
- [3]乌塌菜和白菜台核复等位基因雄性不育系的创制与利用[D]. 王秋实. 沈阳农业大学, 2013(10)
- [4]甜椒CMS育性相关基因的分子标记筛选与应用[D]. 吴国平. 南京农业大学, 2012(01)
- [5]抗根肿病桔红心大白菜雄性不育系转育方法研究[D]. 耿新翠. 沈阳农业大学, 2012(01)
- [6]SCAR标记辅助的大白菜雄性不育系定向转育[J]. 于娜娜,张鲁刚,孙希禄,许小勇,万恩梅,张静. 西北农业学报, 2011(07)
- [7]芸薹属A基因组4种特色叶菜核基因雄性不育系的创制[D]. 杨宁. 沈阳农业大学, 2011(06)
- [8]大白菜核不育基因分子标记研究[D]. 于娜娜. 西北农林科技大学, 2011(04)
- [9]大白菜细胞质雄性不育AFLP分析及花蕾内源激素研究[D]. 孙希禄. 西北农林科技大学, 2011(05)
- [10]大白菜显性核复等位基因雄性不育恢复基因Msf的SSR标记[J]. 王丽丽,魏鹏,刘志勇,李承彧,王玉刚,冀瑞琴,冯辉. 园艺学报, 2010(06)