一、阳城县白桑乡绵羊群暴发肝片吸虫病的诊治（论文文献综述）
郭敏[1]（2007）在《大片吸虫cDNA文库的构建及组织蛋白酶L1基因的克隆和表达》文中认为片形吸虫病（Fasciolasis）是由片形属的肝片吸虫（Fasciola hepitica）和大片吸虫（Fasciola gigantica）寄生于牛、羊等多种动物的胆管和肝脏中引起的一种寄生虫病。该病在我国分布广泛,给畜牧业带来巨大的经济损失。同时片形吸虫的囊蚴也可感染人,严重危害人们的健康,是一种重要的人兽共患寄生虫病。本研究利用SMART cDNA文库构建试剂盒成功构建了大片吸虫成虫cDNA文库,文库库容量为2.08×106 pfu/mL,重组率为98%。扩增后的文库滴度为6.23×109 pfu/mL,插入片段平均大小约为1000 bp。采用PCR从已构建的DNA文库中克隆了组织蛋白酶L1（Fasciola gigantica Cathepsin L1,FgCL1）编码序列,提交GenBank,登录号为EF536899。FgCL1编码序列亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,重组质粒pGEX/FgCL1在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导以包涵体形式表达,其分子量为61KD左右,利用High-Affinity GST Resin亲和层析法进行目的蛋白的纯化,纯度为77.8%。Western-blotting结果表明纯化蛋白可以识别自然感染大片吸虫的牛血清。用纯化的FgCL1作为包被抗原,建立了一种检测片形吸虫病的ELISA诊断方法,并对ELISA反应条件进行了优化。确定抗原的最适包被浓度为4ug/ml;血清的稀释度为1:200,37℃作用0.5h;最佳封闭条件为5%脱脂奶粉,37℃封闭3h;酶标二抗的最佳稀释度是1:16 000,37℃作用0.5h;底物显色时间为20min。根据已经建立的ELISA方法及反应条件,确定阴阳性临界值为0.143。重组抗原与血吸虫、华支睾吸虫、弓形虫无交叉性感染,但与东毕吸虫有轻微交叉反应,说明建立的ELISA方法特异性较好。为我国片形吸虫病的免疫诊断和血清学调查提供了行之有效的技术手段。
陈聪明,孔小利,原崇德[2]（2004）在《阳城县白桑乡绵羊群暴发肝片吸虫病的诊治》文中进行了进一步梳理
孔小利,陈聪明,吉巧眉,杨育勤[3]（2003）在《绵羊暴发肝片吸虫病的诊治》文中指出 2003年9月,山西省阳城县白桑乡某养羊户的羊群发生以精神萎顿,粘膜苍白,食欲废绝,两腿无力并很快死亡为主要症状的疾病,经当地兽医
二、阳城县白桑乡绵羊群暴发肝片吸虫病的诊治（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、阳城县白桑乡绵羊群暴发肝片吸虫病的诊治（论文提纲范文）
（1）大片吸虫cDNA文库的构建及组织蛋白酶L1基因的克隆和表达（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 主要缩写符号表 |
| 前言 |
| 1.1 片形吸虫病的概述 |
| 1.2 关于片形吸虫病的研究展望 |
| 1.3 cDNA 文库在寄生虫研究中的应用 |
| 1.4 半胱氨酸蛋白酶的研究进展 |
| 1.5 研究的目的及意义 |
| 第一章 大片吸虫成虫 cDNA 文库的构建 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 实验材料 |
| 1.1.2 主要仪器 |
| 1.1.3 主要试剂 |
| 1.1.4 主要工具酶 |
| 1.1.5 主要溶液的配制 |
| 1.1.6 实验方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 总RNA 的提取 |
| 1.2.2 双链cDNA 鉴定结果 |
| 1.2.3 酶切后双链cDNA 的过柱 |
| 1.2.4 PCR 鉴定文库中所插入片段的 cDNA 长度 |
| 1.2.5 文库全长性检测 |
| 第二章 大片吸虫组织蛋白酶 L1 基因在大肠杆菌中的表达及重组 蛋白分析 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 菌株及质粒 |
| 2.1.2 血清来源 |
| 2.1.3 主要试剂及酶类 |
| 2.1.4 引物 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 重组质粒的构建 |
| 2.2.2 重组菌的诱导和纯化 |
| 2.2.3 用自然感染大片吸虫的阳性血清进行Western-blotting 检测 |
| 2.2.4 间接酶联免疫吸附实验（ELISA）方法的研究 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 FgCL1 基因的扩增 |
| 2.3.2 重组质粒 pMD18-CL1 和 pGEX-CL1 的双酶切鉴定 |
| 2.3.3 信号肽预测 |
| 2.3.4 序列比对 |
| 2.3.5 重组菌pGEX-CL1/BL21 的诱导表达和纯化 |
| 2.3.6 Western-blotting 检测 |
| 2.3.7 ELISA 诊断方法的研究 |
| 第三章 讨论 |
| 3.1 关于cDNA 文库构建 |
| 3.2 关于组织蛋白酶L1 全长基因的克隆和表达 |
| 3.3 间接ELISA 方法的敏感性和特异性 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
四、阳城县白桑乡绵羊群暴发肝片吸虫病的诊治（论文参考文献）
- [1]大片吸虫cDNA文库的构建及组织蛋白酶L1基因的克隆和表达[D]. 郭敏. 新疆农业大学, 2007(02)
- [2]阳城县白桑乡绵羊群暴发肝片吸虫病的诊治[J]. 陈聪明,孔小利,原崇德. 中国兽医寄生虫病, 2004(01)
- [3]绵羊暴发肝片吸虫病的诊治[J]. 孔小利,陈聪明,吉巧眉,杨育勤. 农村实用技术与信息, 2003(12)