多药耐药蛋白对大鼠皮质细胞外液卡马西平和苯妥英钠的影响

一、多药耐药蛋白对大鼠皮层细胞外液卡马西平和苯妥英钠影响的研究（论文文献综述）

袁斯远,王潇慧,孙江燕,吴婧,刘金民^[1]（2019）在《耐药性癫痫与P糖蛋白的研究进展》文中进行了进一步梳理针对癫痫耐药性发病机制存在多种假说,其中最受关注的为多药转运体假说。该假说认为多药转运蛋白P糖蛋白（P-gp）参与了抗癫痫药物的跨膜转运,能够通过水解三磷酸腺苷（ATP）获取能量将药物逆浓度梯度外排出脑组织,降低脑组织中抗癫痫药物的浓度,而引起癫痫多药耐药。理论上P-gp介导耐药性癫痫假说的成立应当满足以下3个前提:第一,癫痫耐药病人血脑屏障中P-gp高表达;第二,抗癫痫药物为P-gp作用底物;第三,癫痫耐药病人脑组织中抗癫痫药物浓度较药物耐受性癫痫病人低。本研究就这3个方面进行综述,为P-gp介导耐药性癫痫假说的成立提供科学证据。

邹儒毅,马建军^[2]（2017）在《MRP1表达与难治性癫痫的关系研究进展》文中研究表明国际抗癫痫联盟（ILAE）对癫痫的定义为,癫痫是一种持续存在着能够增加未来出现癫痫发作的脑部疾患,会引起相应的神经生物学、认知、心理学和社会功能的改变,诊断癫痫至少需要一次癫痫发作[1]。2010年ILAE对难治性癫痫的定义达成共识,两种正确选择、可耐受的抗癫痫药（antiepileptic drugs,AEDs）,经足够疗程及剂量治疗仍不能控制发作的癫痫[2]。目前国内对难治性癫痫尚无统一的诊断标

朱潇颖,赵永波^[3]（2015）在《PGP和MRP在难治性癫痫耐药机制中作用的研究》文中研究指明癫痫是神经科一种常见的疾病,是由于一侧或两侧大脑半球神经元异常同步放电引起的短暂性脑功能障碍,临床表现为突然出现、反复发生的惊厥行为。随着对癫痫发病机制的深入研究和新的抗癫痫药物的应用,大部分癫痫患者的预后较好,但仍有约1/3的患者表现对抗癫痫药物不敏感,出现难以被控制的频繁发作的惊厥行为,临床上称之为难治性癫痫。难治性癫痫预后差,具有较高的致残率和病死率,是困扰神经科医生的一个难题。因此研究难治性癫痫对抗癫痫药物产生耐药的原因,

张亚楠,戴园园,李蕊,孙明霞,程华^[4]（2013）在《奥卡西平对红藻氨酸点燃发育期慢性癫大鼠海马多药耐药相关蛋白1表达的影响》文中研究表明目的建立发育期慢性癫大鼠模型,观察海马区多药耐药相关蛋白1（MRP1）的表达,并探讨奥卡西平（OXC）对其表达的影响。方法将健康的14 d SD大鼠100只随机分为模型组（n=52）和对照组（n=48）,模型组予以腹腔注射红藻氨酸（KA）1 mg/kg（质量浓度0.5 g/L）建立慢性癫模型,注射后连续观察8 h,按照Lado癫行为分级,癫发作达5级以上并出现癫持续状态的大鼠,且2周后出现自发性反复惊厥发作者视为造模成功;而对照组仅腹腔注射相同剂量的9 g/L盐水。将造模成功后存活的48只大鼠随机分为KA组24只,KA+OXC组24只,对照组48只大鼠随机分为NS组、NS+OXC组各24只,其中均于癫自发性反复发作后开始用药,根据其疗程不同分为第4周组、第6周组、第8周组,然后将所有大鼠灌注取脑,用免疫组织化学法测定大鼠海马CA3区MRP1的表达。结果 1.大鼠行为学:NS组及NS+OXC组大鼠无性发作,进入慢性期后,KA组、KA+OXC各组大鼠均出现自发性性发作,但KA+OXC组发作频率较KA组明显降低（P<0.05）。2.NS组、NS+OXC组大鼠海马CA3区仅有少量MRP1阳性细胞表达,二者比较差异无统计学意义（P>0.05）;随着观察时间的延长,KA组MRP1阳性细胞渐升高,与NS组比较各时间点差异均有统计学意义（P<0.05）;KA+OXC组MRP1免疫组织化学法阳性细胞与KA组有类似趋势,2组比较在第4周、第6周表达量差异均无统计学意义（P均>0.05）;而在第8周时MRP1表达量明显增高,差异有统计学意义（P<0.05）;各时间点KA+OXC组与NS+OXC组MRP1表达量差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 MRP1参与慢性癫耐药的发生,OXC长期干预治疗可能诱导大鼠MRP1的表达。

伍国锋^[5]（2010）在《海马电刺激对耐药性癫痫大鼠脑组织GABA受体表达及钠通道电流的影响》文中提出目的：建立多药耐药性颞叶癫痫模型,以海马细胞外液GABA浓度、海马细胞GABA（A）和GABA（B）受体表达以及海马CA1区锥体细胞钠通道电流的变化为观察指标,探讨海马电刺激治疗耐药性颞叶癫痫的可能机制。方法：选用Wistar大鼠230只制作慢性杏仁核点燃癫痫模型,模型制作成功后用经典抗癫痫药苯妥英钠和苯巴比妥进行筛选,根据癫痫大鼠对药物的反应区别出耐药癫痫大鼠及药物敏感大鼠用于下列实验：1)用微透析方法收集脑组织细胞外液,采用高效液相色谱法检测海马电刺激后GABA含量的变化；2)用免疫组织化学方法观察海马电刺激后脑组织内GABA（A）和GABA（B）受体表达的变化；3)用荧光定量PCR方法观察海马电刺激后GABA（A）和GABA（B）受体mRNA表达的变化；4)用膜片钳全细胞记录模式观察海马电刺激后脑细胞钠通道电流的变化。结果：1)在全部大鼠中成功点燃120只（点燃成功率52%）,其中112只大鼠完成筛选过程,筛选出耐药性癫痫大鼠30只（癫痫耐药率26.8%）；2)脑细胞外液GABA浓度的变化：海马刺激组8-9AM和8-9PM两个时段的GABA浓度分别为32.69±7.80（μg/ml）和35.76±6.27（μg/ml）,各时段的GABA浓度都明显高于对照组的26.58±6.87（μg/ml）和31.50±4.87 （μg/ml）,差异具有显着性（P<0.05）；3)GABA（A）和GABA（B）受体表达的变化：与耐药对照组比较,海马刺激组GABA（A）受体阳性细胞数无明显变化,但其表达的灰度值降低,提示GABA（A）受体表达增强,GABA（B）受体阳性细胞数增多、灰度值降低,表明GABA（B）受体表达增强,差异具有显着性（P<0.05）；4)荧光定量PCR结果表明,海马刺激组GABA（A）和GABA（B）受体mRNA的ΔCt值和2（△△Ct）分别为4.180±0.386和1.120±0.324,与耐药对照组比较,其表达均明显增强（P<0.05）；5)膜片钳全细胞记录观察结果表明,海马刺激组钠通道电流峰值及激活曲线向去极化方向偏移,失活曲线向超极化方向偏移,钠通道失活后恢复时间延长。结论：海马电刺激可以增加耐药性颞叶癫痫大鼠脑细胞外液GABA浓度,增加脑组织GABA（A）和GABA（B）受体的含量,增加GABA（A）和GABA（B）受体mRNA的表达,并可降低脑细胞兴奋性,减少癫痫性电活动的产生。

潘利忠^[6]（2010）在《平痫冲剂对慢性癫痫大鼠脑内谷氨酸、γ-氨基丁酸含量的影响及多耐药基因表达的研究》文中指出目的：通过平痫冲剂对慢性癫痫幼龄大鼠脑组织海马内谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）含量的影响及多耐药基因表达的研究,探讨平痫冲剂抗癫痫的作用机制。实验一：方法：采用SPF级新生28天Wistar幼龄大鼠60只,体重70±10g,雌雄各半；依据随机数字表分组法将60只幼龄大鼠随机分为6组,每组10只,即正常对照组（A组）、模型对照组（B组）、平痫冲剂大剂量组（C组）、平痫冲剂中剂量组（D组）、平痫冲剂小剂量组（E组）、阳性对照组（F组）。除A组给予生理盐水外其余各组均用戊四唑（PTZ）亚惊厥剂量持续腹腔注射法复制出癫痫点燃模型；在造模成功后,A、B组给予生理盐水,F组给予苯巴比妥,D、C、E组给予平痫冲剂；治疗21天后断头处死取其脑组织,通过生物化学方法和生物化学技术检测幼龄大鼠脑组织中海马内的Glu、GABA含量水平。结果：对于Glu含量,模型对照组与正常对照组比较Glu含量明显增加；而平痫冲剂大剂量组、平痫冲剂中剂量组、平痫冲剂小剂量组和阳性对照组与模型对照组比较,Glu含量都有不同程度的下降（P<0.01）（P<0.05）。对于GABA含量,模型对照组与正常对照组比较GABA含量明显降低；而平痫冲剂大剂量组、平痫冲剂中剂量组、平痫冲剂小剂量组和阳性对照组与模型对照组比较,GABA含量都有不同程度的升高（P<0.01）（P<0.05）。结论：平痫冲剂能够抑制实验性癫痫幼龄大鼠兴奋性氨基酸递质的活性,并提高其抑制性氨基酸递质的活性,从而提高癫痫发作阈值,降低大脑皮层的兴奋性,使得兴奋性氨基酸递质与抑制性氨基酸递质重新得以平衡,有效抑制癫痫的发作。实验二：方法：本研究在建立匹罗卡品癫痫持续状态后慢性难治性癫痫模型的基础上,通过比较不同药物干预下对多药耐药转运蛋白及基因P-gp/MDR1mRNA和MRP1mRNA的影响,从病理组织学进行疗效分析,观察难治性癫痫大鼠脑内P-gp/MDR1mRNA和MRP1mRNA的表达和分布,在形态和功能不同角度研究多药耐药转运蛋白及基因P-gP/MDR1mRNA和MRP1mRNA在慢性难治性癫痫多药耐药机制中的作用,并探讨难治性癫痫多药耐药可能的分子病理机制,及中药平痫冲剂对其表达的影响,进而探讨平痫冲剂对难治性癫痫的作用机制。实验动物及分组：同实验一。平痫冲剂对难治性癫痫大鼠脑组织P-gp及多药耐药基因MDR1mRNA和MRP1mRNA的表达的影响。采用荧光实时定量PCR、免疫组化和Westem-blot的方法,观察难治性癫痫大鼠脑内海马和皮层部位多药耐药转运蛋白及基因P-gp/MDR1和MRP1的表达和分布。探讨难治性癫痫多药耐药可能的分子病理机制及平痫冲剂对其表达的影响。结果：采用荧光实时定量PCR、免疫组化和westem-blot的方法检测P-gp、MDR1-mRNA、MRP1-mRNA的表达结果相一致。（1）与正常对照组比较,模型对照组,平痫冲剂大剂量组,平痫冲剂中剂量组,平痫冲剂小剂量组,阳性对照组P-gp/MDR1-mRNA、MRP1-mRNA在海马、皮质部位的表达增加,有显着性差异（P<0.05）。模型对照组,平痫冲剂大剂量组,平痫冲剂中剂量组,平痫冲剂小剂量组,阳性对照组之间均无差异（P>0.05）。但P-gp/MDR1-mRNA、MRP1-mRNA其表达含量由低到高依次是平痫冲剂中剂量组、平痫冲剂大剂量组、平痫冲剂小剂量组、模型对照组、阳性对照组。（2）模型对照组,平痫冲剂大剂量组,平痫冲剂中剂量组,平痫冲剂小剂量组,阳性对照组,P-gp、MDR1-mRNA、MPR1-mRNA在海马与其在皮质部位表达含量之间无明显差异,无统计学意义（P>0.05）,但皮质部位的表达含量略高于其在海马部位的表达。结论：1匹罗卡品诱发的癫痫持续状态后慢性难治性癫痫模型,皮层和海马P-gp从MDR1mRNA和MRP1mRNA呈高表达。难治性癫痫的耐药可能与P-gp/MDR1mRNA和MRP1mRNA的高表达有关。2癫痫的反复发作可以诱导慢性难治性癫痫大鼠海马和皮层P-gp/MDR1mRNA和MRP1mRNA的表达,当发作与抗癫痫药物如卡马西平共同作用时,多药耐药蛋白、基因的表达增加,反复癫痫发作和抗癫痫药物都参与了对多药耐药蛋白及基因P-gp从MDR1mRNA、MRP1mRNA的诱导。3中药平痫冲剂具有一定的抑制P-gP/MDR1、MRP1的药物转运体功能,可以下调P-gP/MDR1mRNA、MRP1mRNA的表达。中药平痫冲剂对药物转运体抑制功能可能是其治疗难治性癫痫的作用机制。

马爱梅,张守文,胡风云,刘玉玺^[7]（2009）在《多药转运蛋白对癫痫大鼠脑内奥卡西平浓度的影响》文中进行了进一步梳理目的观察多药转运蛋白家族的成员P-糖蛋白（P-glycoprotein,PGP）和多药耐药蛋白（multi-drugre-sistance associated protein,MRP）对匹罗卡品慢性癫痫大鼠模型海马内神经元细胞外液中奥卡西平浓度的影响,证明奥卡西平是否为PGP和MRP的底物,探讨PGP和MRP参与难治疗性癫痫耐药的机制。方法建立匹罗卡品慢性癫痫动物模型,将32只大鼠分为对照组、模型组、维拉帕米干预组、丙磺舒干预组（每组8只）,于腹腔注射奥卡西平（80mg/kg）后30、60、90、120、150min,通过微透析及高效液相色谱技术,检测大鼠海马神经元细胞外液中的药物浓度。结果维拉帕米干预后,癫痫大鼠海马细胞外液中奥卡西平的浓度于给药后90～120min（1.26±0.09、0.93±0.10）明显高于模型组（0.87±0.06、0.66±0.04）,两组比较有统计学差异（P<0.05）;丙磺舒干预后60～150min,大鼠海马内细胞外液中奥卡西平的浓度（1.07±0.11、1.32±0.13、1.02±0.10、0.87±0.08）显着高于模型组（0.81±0.08、0.87±0.06、0.66±0.04、0.58±0.06）（P<0.05）。结论奥卡西平是PGP和MRP的底物,PGP和MRP能够选择性的将奥卡西平泵出血脑屏障外,降低癫痫病灶内的药物浓度,上述机制可能参与了难治性癫痫患者对奥卡西平产生耐药。

马爱梅,张守文,刘玉玺,胡风云^[8]（2009）在《多药转运蛋白对匹罗卡品癫癎大鼠模型脑内拉莫三嗪浓度的影响》文中认为目的观察多药转运蛋白[P-糖蛋白（P-glycoprotein,PGP）和多药耐药相关蛋白（multidrugresistance associated protein,MRP）]对匹罗卡品慢性癫痫大鼠模型海马内拉莫三嗪浓度的影响,探讨 PGP 和 MRP 在难治性癫痫多药耐药机制中的作用。方法建立匹罗卡品慢性癫痫动物模型,在模型大鼠海马内安置微透析探针,腹腔注射拉莫三嗪（10 mg/kg）后于不同时间点收集透析液,并用高效液相色谱检测其中的药物浓度。通过微透析探针局部分别给予 PGP 拮抗剂维拉帕米和 MRP拮抗剂丙磺舒,观察维拉帕米和丙磺舒对模型鼠海马内神经元细胞外液拉莫三嗪浓度的影响。结果维拉帕米明显升高了癫痫大鼠海马细胞外液拉莫三嗪的药物浓度,在给药后60、90、120、150 min（0.65±0.11、0.84±0.09、0.70±0.09和0.58±0.08）与模型组（0.41±0.10、0.50±0.04、0.39±0.09和0.30±0.06）比较差异有统计学意义（F=5.01、8.61、10.23、7.89,P<0.05）,丙磺舒也提高了海马内拉莫三嗪的浓度,给药后90、120、150 min（0.75±0.09、0.58±0.10和0.49±0.07）与模型组比较差异有统计学意义（F=6.58、4.56、4.75,P<0.05）。结论 PGP 和 MRP 均能够限制拉莫三嗪通过癫痫大鼠血脑屏障,从而降低了海马内拉莫三嗪的药物浓度,上述机制可能参与了难治性癫痫耐药的发生。

张琴琴^[9]（2009）在《胺甲斑蝥素的抗惊厥作用及对耐药惊厥大鼠脑内mdr1mRNA和Pgp表达的影响》文中进行了进一步梳理目的研究胺甲斑蝥素（4-Amino-2-Methyl-Cantharidinimide, AMC）的抗惊厥作用、中枢神经系统（CNS）毒性作用及其体存药效动力学。观察AMC对青霉素慢性点燃耐苯妥英钠大鼠模型的对抗作用及对耐药大鼠脑内mdr1mRNA和P-糖蛋白（Pgp）表达的影响,从基因和蛋白水平探讨AMC抗耐药作用机制。方法（1）采用最大电休克惊厥模型,以卡马西平、托吡酯为阳性对照,分析灌胃（ig）小鼠不同剂量AMC的量效和时效关系,按Bliss法计算抗MES的ED50,比较其效价强度和效能;采用戊四唑惊厥模型比较各药的惊厥潜伏期、抗惊厥率;采用转轮法,分析灌胃（ig）小鼠各药后的CNS毒性作用,按Bliss法计算TD50,比较各药的毒性大小;（2）采用药效法,运用数学模式及参数来模拟各药在体内的药效动力学过程;（3）采用青霉素(PNC,3×106 U·kg-1,ip)连续点燃13天的方法建立大鼠惊厥模型。灌胃惊厥大鼠苯妥英钠(PHT,0.225g·kg-1·d)21天,建立耐药模型。以惊厥潜伏期和Racine行为学分级作为评定药效指标。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测AMC(0.175g·kg-1、0.0875g·kg-1,ig)、氟桂利嗪(FLU,0.0875g·kg-1,ig,阳性对照)对耐药惊厥大鼠脑内Pgp基因mdr1的表达变化,采用免疫组化（SABC法）技术,检测脑内Pgp的表达变化。结果（1）AMC、卡马西平、托吡酯对MES模型均有对抗作用,量效呈正相关性,各药抗惊率分别为:AMC100%,托吡酯90%,卡马西平100%;ED50分别为AMC(0.022 g·kg-1),托吡酯(0.22 g·kg-1),卡马西平(0.016 g·kg-1);（2） AMC、卡马西平、托吡酯可对抗MET发作,MET惊厥潜伏期数值依次为:AMC（9.70±3.16min）,托吡酯（9.57±4.47min）,卡马西平（9.51±2.52 min）;（3） AMC、卡马西平、托吡酯均有CNS毒性作用,其TD50值依次为:AMC(0.545g·kg-1)、TPM(0.492g·kg-1)、CBZ (0.141g·kg-1);（4）体存药效动力学研究结果表明,各药的最小起效剂量由低到高为:AMC(0.0032 g·kg-1)、卡马西平、托吡酯;达峰时间由快到慢为:AMC（0.2h）、卡马西平、托吡酯;半效期由长到短为:AMC（3.0h）、卡马西平、托吡酯;药效作用持续时间由长到短为:AMC（15.6h）、托吡酯、卡马西平;消除速率常数AMC（0.2）小于其它两药;（5）大鼠经小剂量青霉素(PNC,3×106U·kg-1)筛选后出现Racine IV-V级发作,确定点燃成功;惊厥大鼠灌胃苯妥英钠0.225g·kg-1·d,每日1次持续3周。耐苯妥英钠组大鼠的惊厥潜伏期（20.62±9.80min）与惊厥模型对照组（19.27±10.55min）相比较差别无统计学意义（P>0.05）,且均出现Racine IV-V级发作,提示耐苯妥英钠惊厥模型制备成功,模型成功率达100﹪;（6）灌胃两种剂量AMC和FLU能使耐药大鼠痫性行为较耐药惊厥模型对照组减轻（P<0.01）,惊厥潜伏期延长（P<0.01）;（7）正常对照组mdr1 mRNA表达量（0.83±0.09）,惊厥模型组mdr1 mRNA表达量较正常对照组增加,差异有统计学意义（P<0.05）;耐苯妥英钠惊厥模型组mdr1mRNA表达量较惊厥模型组继续增高,且统计学上具有显着性差异（P<0.01）;分别灌胃两种剂量AMC及FLU后,mdr1mRNA表达量降低,与耐药模型组相比均有显着性统计学差异（P <0.01）;AMC小剂量组mdr1 mRNA表达量较大剂量组多,但两剂量组mdr1 mRNA表达均比FLU组少;（8）正常对照组Pgp表达量（1.83±1.72）,模型对照组Pgp表达量比正常对照组增高,有显着性统计学差异（P<0.01）;耐苯妥英钠惊厥模型组大鼠的Pgp表达量较惊厥模型组明显增高,有显着性统计学差异（P<0.01）;AMC大、小剂量组以及FLU阳性对照组Pgp水平均较耐药模型组降低,统计学上均有显着性差异（P <0.01）;但FLU组Pgp表达量比AMC大、小剂量组多。各组Pgp表达变化趋势与RT-PCR测定的mdr1 mRNA表达变化结果一致。结论（1）AMC能够对抗MES发作,抗惊厥最大效能比托吡酯强而与卡马西平相似,效价强度较托吡酯大而与卡马西平相似;（2） AMC、卡马西平、托吡酯均可对抗MET发作,AMC抗MET发作的最大效能与托吡酯、卡马西平相似;（3）AMC、卡马西平、托吡酯均有CNS毒性,其中AMC毒性最小;（4）AMC与卡马西平和托吡酯相比,最小起效剂量最低、达峰时间最快、半效期和作用持续时间最长、消除较慢。（5）小剂量青霉素点燃13天,可建立惊厥模型,灌胃苯妥英钠21天,惊厥大鼠对苯妥英钠产生耐受,耐药惊厥模型造模成功;（6）灌胃两种剂量AMC和FLU能使耐药大鼠痫性行为减轻,惊厥潜伏期延长,对耐苯妥英钠惊厥大鼠惊厥发作有对抗作用;（7）正常大鼠脑内的mdr1mRNA和Pgp仅有微量表达,PNC可诱导mdr1mRNA和Pgp的表达;灌胃苯妥英钠21天,两者表达进一步显着增高。两种剂量AMC和FLU能抑制耐药惊厥大鼠脑内mdr1mRNA表达,降低耐药惊厥大鼠脑内Pgp的含量,说明AMC及FLU的抗耐药机制与其抑制耐药惊厥大鼠脑内mdr1mRNA基因表达产物Pgp有关。（8）AMC和FLU抑制Pgp表达变化趋势与RT-PCR测定的mdr1mRNA表达变化结果一致,说明两药抑制Pgp表达的直接原因是通过抑制mdr1mRNA表达实现的,AMC作用性质与FLU相似,但AMC的抗耐药作用较FLU强。

林娟霞^[10]（2009）在《耐药蛋白抑制剂维拉帕米治疗难治性癫痫的实验研究》文中研究指明研究背景:癫痫是神经内科常见的疾病,是由于一侧或两侧大脑半球神经元异常同步放电引起的短暂性脑功能障碍,尽管不断有新的抗癫痫药（antiepileptic drugs,AEDs）投入临床应用,但仍有大约20%-30%的患者发展为难治性癫痫（refractory epilepsy,RE）。目前有关难治性癫痫耐药性的机制尚不十分清楚。有研究显示血脑屏障（blood-brain barrier,BBB）血管内皮细胞膜上存在多种药物外向转运体,这些转运体构成BBB的另一道屏障,与癫痫的多药耐药性相关[9]。多药转运体是一些能与药物结合并能将其转运出细胞的蛋白,包括三磷酸腺苷结合盒（ABC）超家族成员如磷酸糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）、多药耐药相关蛋白、乳腺癌抗药蛋白、大脑多药抗药蛋白和Ras超家族成员RL-IP76。生理条件下多药转运体作为外排泵,能够主动将药物泵出到血脑屏障以外,从而保护脑实质。因此多药转运体的表达和脑组织内药物浓度降低成正比[10],P-gp是首先被发现的多药耐药蛋白质,它由多药耐药基因（multidrug resistant gene,MDR）编码,病理情况下如癫痫发作的强度、时程、长期服用抗癫痫药等都可以使P-gp表达上调,限制癫痫药物进入脑组织,使患者脑内抗癫痫药物浓度下降,这可能参与了难治性癫痫多药耐药的发生。因而改善耐药性癫痫预后的方法就是针对耐药性癫痫P-gp的过度表达,避免P-gp的外排作用、加强抗癫痫药物的作用。目前有许多抑制P-gp的药物逐渐被证实,包括钙通道阻滞剂、激素、蛋白激酶C抑制剂、免疫抑制剂、抗生素、表面活性剂等。但是这些研究多集中在对P-gp功能的影响,鉴于此,本课题拟建立慢性癫痫模型,给予P-gp抑制剂联合常规抗癫痫药物,研究P-gp抑制剂对难治性癫痫脑组织P-gp表达的影响,探讨P-gp抑制剂的价值,为临床难治性癫痫的治疗提供新的方向。目的建立氯化锂-匹罗卡品慢性癫痫模型,观察P-gp抑制剂维拉帕米对难治性癫痫大鼠的脑电图、自发性癫痫的发作频率和程度、大脑皮层及海马组织P-gp表达的影响。方法（1）建立氯化锂-匹罗卡品慢性癫痫模型:雄性wistar大鼠50只,安装大脑皮层电极,两周之后,给予氯化锂-匹罗卡品,诱发大鼠癫痫持续状态,终止发作后存活且状态良好的大鼠出现自发性癫痫视为造模成功。（2）将造模成功的大鼠,经过耐药性选择后,分为生理盐水组、匹罗卡品组、卡马西平组、低剂量维拉帕米组、高剂量维拉帕米五个组。分别给予相应的药物,观察各组大鼠自发性癫痫的发作次数与发作级别,并记录各组大鼠在不同时期的脑电图,取包括海马在内的脑块,通过免疫组化染色,图像分析各组P-gp表达阳性面积率,半定量测定大鼠海马组织及皮层P-gp的表达程度。结果（1）造模过程中,除生理盐水组的6只大鼠之外,其余44只大鼠均诱发出癫痫持续状态,存活且状态良好者38只,出现自发性癫痫者32只。造模成功率为72.73%,行为学上表现为:出现以口咽自动症为主的复杂部分发作,发展为强直阵挛发作,癫痫持续状态一小时后给与安定中止发作;两天后进入静止期,两周左右发展为反复自发发作。（2）慢性期卡马西平组大鼠的自发性癫痫发作次数发作程度与匹罗卡品组比较无明显差别（P>0.05）,两个维拉帕米组与前两组比较大鼠的发作频率明显减少（P<0.05）,发作程度明显减轻（P<0.05）。两个维拉帕米剂量组之间比较差异没有统计学意义（P>0.05）。脑电图示:匹罗卡品组、卡马西平组出现阵发的多棘波,后者较前者波幅压低,维拉帕米组散在出现单个棘波或尖波,且波幅明显降低。（3）P-gp的表达结果:海马P-gp的表达较皮层多（P<0.05）,各组之间比较:与生理盐水组相比,其他四组的P-gp的表达均增强,且四组之间阳性面积率从高到低依次是且卡马西平组、模型组、两个维拉帕米组,它们之间均有明显差异（P<0.05）,而维拉帕米两个剂量组之间无明显差异（P>0.05）。结论（1）本实验建立的匹罗卡品癫痫模型复制了人类颞叶癫痫复杂部分发作基本特征,是进行难治性癫痫研究的一个较为理想的动物模型。（2）维拉帕米可以抑制大鼠的痫性放电,明显的减少自发性癫痫的发作频率,减轻发作程度。（3）维拉帕米可以抑制P-gp的功能,降低难治性癫痫大鼠脑内P-gp表达量。

二、多药耐药蛋白对大鼠皮层细胞外液卡马西平和苯妥英钠影响的研究（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、多药耐药蛋白对大鼠皮层细胞外液卡马西平和苯妥英钠影响的研究（论文提纲范文）

（1）耐药性癫痫与P糖蛋白的研究进展（论文提纲范文）

（2）MRP1表达与难治性癫痫的关系研究进展（论文提纲范文）

（5）海马电刺激对耐药性癫痫大鼠脑组织GABA受体表达及钠通道电流的影响（论文提纲范文）

（6）平痫冲剂对慢性癫痫大鼠脑内谷氨酸、γ-氨基丁酸含量的影响及多耐药基因表达的研究（论文提纲范文）

（7）多药转运蛋白对癫痫大鼠脑内奥卡西平浓度的影响（论文提纲范文）

（9）胺甲斑蝥素的抗惊厥作用及对耐药惊厥大鼠脑内mdr1mRNA和Pgp表达的影响（论文提纲范文）

（10）耐药蛋白抑制剂维拉帕米治疗难治性癫痫的实验研究（论文提纲范文）

四、多药耐药蛋白对大鼠皮层细胞外液卡马西平和苯妥英钠影响的研究（论文参考文献）

• [1]耐药性癫痫与P糖蛋白的研究进展[J]. 袁斯远,王潇慧,孙江燕,吴婧,刘金民. 中西医结合心脑血管病杂志, 2019(22)
• [2]MRP1表达与难治性癫痫的关系研究进展[J]. 邹儒毅,马建军. 临床神经外科杂志, 2017(02)
• [3]PGP和MRP在难治性癫痫耐药机制中作用的研究[A]. 朱潇颖,赵永波. 中华医学会神经病学分会第十次全国脑电图与癫痫诊治进展高级讲授班及学术研讨会日程册&论文汇编, 2015
• [4]奥卡西平对红藻氨酸点燃发育期慢性癫大鼠海马多药耐药相关蛋白1表达的影响[J]. 张亚楠,戴园园,李蕊,孙明霞,程华. 中华实用儿科临床杂志, 2013(15)
• [5]海马电刺激对耐药性癫痫大鼠脑组织GABA受体表达及钠通道电流的影响[D]. 伍国锋. 复旦大学, 2010(11)
• [6]平痫冲剂对慢性癫痫大鼠脑内谷氨酸、γ-氨基丁酸含量的影响及多耐药基因表达的研究[D]. 潘利忠. 南京中医药大学, 2010(12)
• [7]多药转运蛋白对癫痫大鼠脑内奥卡西平浓度的影响[J]. 马爱梅,张守文,胡风云,刘玉玺. 中国神经精神疾病杂志, 2009(12)
• [8]多药转运蛋白对匹罗卡品癫癎大鼠模型脑内拉莫三嗪浓度的影响[J]. 马爱梅,张守文,刘玉玺,胡风云. 中华神经科杂志, 2009(08)
• [9]胺甲斑蝥素的抗惊厥作用及对耐药惊厥大鼠脑内mdr1mRNA和Pgp表达的影响[D]. 张琴琴. 山西医科大学, 2009(10)
• [10]耐药蛋白抑制剂维拉帕米治疗难治性癫痫的实验研究[D]. 林娟霞. 山西医科大学, 2009(10)

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